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未知样品分析 一、样品的性质 我们应该尽可能多的从客户或研发该样品的人员那里获得一些相关的信息，因为我们公司研发的都是根据客户需要进行研制的。这些信息对以后的相应研发出来的样品的分析是非常重要的。内容包含：使用溶剂名称、分离的方法、单体化合物的性质、分子式、颜色反应、光谱学数据、待测物的理化性质，如极性、溶解性、酸碱性、稳定性、熔点或蒸汽压、波谱学性质等等，。再进行必要地文献查阅工作，收集文献资料分析工作非常有用，详见附表1送样信息单。 1、溶解性和极性 一般我们会从水开始试验它的溶解情况，然后是乙醇、甲醇、乙腈、氯仿、乙酸乙酯等极性溶剂；最后是戊烷、己烷、庚烷等非极性溶剂；或者他们之间的两两组合或多种组合在一起。分别进行平行试验，得到样品的溶解性。利用相似相溶原理确定其极性：溶于极性溶剂表明它的和溶剂的极性差不多，若果溶于非极性溶剂表明它也是非极性的。常见溶剂极性及相关性质见附表2。 2、样品的纯度 如果是固体样品可以根据其外观大概的估计其纯度：检查有无均匀一致的晶形，有无明确、敏锐的熔点（熔距一般为1-2℃）。 将样品溶液点于硅胶薄层板上，应注意点样量不可太小，根据第一步得到的大概极性选择与其相当极性的多种不同的展开剂。展开后，吹干，显色（一般用常用显色剂如：硫酸乙醇）。Rf值要大于0.5。检查其斑点情况，只有一个斑点者可以初步认为是单一物质。 纯度检查流程检测单见附表3 3、样品的分子量范围 选择分析方法的另一重要信息是了解样品分子的大小或分子量范围，这可通过体积排阻色谱法获得相关的信息。根据体积排阻色谱固定相的性质，即可对水溶性样品又可对油溶性进行分析。另外分子量测定方法有：冰点下降法（固体物质）、沸点上升法（液体物质）、黏度法和质谱法（最常用）。 4、其他理化性质 （1）固体样品包括熔点、比旋度等 （2）液体样品包括沸点、折光率、比旋度等。 二、对样品进行紫外扫描 我们可以对样品溶液进行全波长扫描，扫描范围200nm-400nm。可以选择使用紫外分光光度计进行检测，也可以使用有紫外检测器的液相色谱仪??行检测，得到紫外扫描图谱。我们可以根据紫外图谱进行官能团的推测，再根据其他方法一起可以确定样品的结构： （1）若化合物在220～800nm无吸收，说明可能是脂肪族饱和碳氢化合物。没有直链或环状共轭双键、醛基、酮基、硝基、溴或碘等。 （2）若化合物在210～250nm有吸收，可能含有两个共轭单位（-C=C-C=C-）。 （3）若化合物在260～300～330nm有强吸收，可能含有3～5个共轭单位。 （4）若化合物在250～300nm有弱吸收(ε＝10-100)，可能含有羰基（C=O）存在。 （5）若化合物在250～300nm由中强吸收(ε=1000-10000)，且有不同程度的精细结构，表示有苯环存在。 （6）若化合物在300nm以上有高强吸收，其共轭生色团在5个以上，若同时具有精细结构，则说明为稠环芳烃、稠环杂芳烃或其衍生物。 （7）如果化合物有颜色，则分子中共轭单位总数大于5(但硝基化合物，偶氮化合物、重氮化合物、亚硝基化合物等含氮化合物，以及α-二酮、乙二醛和三碘甲烷例外)。 也可以根据确定含量测定方法，没有紫外吸收的可以选择用GC或者其他方法，有吸收就可以选择HPLC，并找出最佳吸收波长。对于有一定挥发性的样品应尽量利用气相色谱进行分离分析．对于溶于非极性溶剂非极性化合物，可以利用气相色谱进行分离分析。 三、分析方法的选择 我们通过试验得到的性质，综合从客户或研发人员那里得到的信息我们可以对样品的分析方法进行选择。通常我们采用HPLC和GC。 3.1 HPLC 3.1.1 柱分离模式选择 色谱方法选择 非极性化合物通常可选用吸附色谱法或正相分配色谱法、正相键合色谱法进行分析。若样品溶于极性溶剂或相混合的极性溶剂，表明样品为极性化合物，通常可选反相分配色谱法或更为广泛应用的反相键合相色谱法进行分析。 若样品溶于水相，可首先检查溶液的PH值，若呈中性为非离子型组分，长可用反相（或正相）键合相色谱法进行分析。若PH呈弱酸性，可采用抑制样品电离的方法，在流动相中加入H2SO4、H3PO4调节PH=2-3，在用反相键合色谱法进行分析。若PH呈弱碱性，则可向流动相中加入阳离子型反离子，再用离子色谱法进行分析。若PH呈强酸性或强碱性，则可用离子色谱法进行分析。 对油溶性样品，若分析结果表明样品分子量小于2000，且分子量差别不大，应进一步判定其为非离子型还是离子型。若为非离子型，则应考虑其是否为同分异构体或具有不同极性的组分，此时可采用吸附色谱法或键合色谱法进行分离；若为离子型，则可用离子对色普法进行分析。若分析结果表明样品分子量小于2000，且分子量差别很大，则仅能用刚性凝胶的凝胶渗透色谱法或键合相色谱法进行分