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内皮保护剂治疗川崎病的作用及机制研究 中文摘要 内皮保护剂治疗川崎病的作用及机制研究 中文摘要 第一部分：异种动物蛋白诱导川崎病兔模型的制作及评价 目的： 探讨通过耳缘静脉重复注射异种动物蛋白诱导幼兔产生冠状动脉炎，验证其与川 崎病冠状动脉病变的相似性，为研究川崎病提供实验模型。 方法： 20 只4-6 周龄的日本大耳幼兔随机分为模型组和对照组。两组分别给予 10%牛 血清白蛋白和生理盐水，第1 天、第14 天各重复注射一次。在首次注射后的第六周， 两组幼兔分别行冠脉造影，并在造影结束后一小时之内显微镜下分离冠状动脉行组织 病理学检测和超微结构的电镜观察，并留取肝脏、肾脏、肺脏及脾脏行组织病理学检 查。 结果： (1) 冠脉造影：仅模型组发现 3 只兔的冠状动脉出现不同程度的扩张或狭窄 （3/10 ）；(2) 组织病理学：模型组所有幼兔冠状动脉均出现内皮增厚、炎性细胞浸 润，不连续的冠脉内皮；肺组织、肾脏组织呈现肉芽肿样改变主要由单核细胞组成， 且肺组织病变部位小血管腔几乎完全被阻塞，部分肺泡塌陷，肺泡水肿不明显；肝脏 组织出现点状坏死，单核细胞聚集；(3) 透射电镜结果：模型组兔冠状动脉部分内弹 力膜断裂，内皮不连续，伴有内皮细胞脱落和中层平滑肌细胞肿胀变性。 结论： 本研究证实牛血清白蛋白诱导产生的兔免疫性冠状动脉炎，类似川崎病冠状动脉 炎改变，可作为模拟川崎病冠状动脉损伤的实验模型。 关键词：川崎病；兔模型；异种抗原 I 中文摘要 内皮保护剂治疗川崎病的作用及机制研究 第二部分：辛伐他汀治疗川崎病的作用及其机制研究 目的： 内皮细胞保护剂尚未作为川崎病的常规治疗手段，本研究拟在川崎病幼兔模型 上，给予内皮保护剂辛伐他汀干预后，观察其对川崎病的发病、病理改变及对内皮功 能的影响，并探讨其中的机制，从而为从内皮细胞保护的角度防治川崎病提供初步的 实验依据。 方法： 1.实验分组：将 30 只日本大耳幼兔随机分为模型组、辛伐他汀干预组、对照组 三组。模型组及辛伐他汀干预组均予耳缘静脉注射牛血清白蛋白 （10%，3ml/kg ）， 对照组给予生理盐水（3ml/kg ），第 1 天、第 14 天各重复注射一次。辛伐他汀干预 组于第2 次注射后连续三周每天予辛伐他汀干预（5mg/kg.d ）灌胃；三组分别于第2 次注射后第7、14、21 天 （即急性期、亚急性期、恢复期）分别采血一次。 2.检测方法： （1）评价建模成功的方法：① 组织病理学检测各组幼兔的心肌及冠脉组织改变 情况；② 各组幼兔行冠状动脉造影检查； （2）ELISA 法检测血浆内皮型一氧化氮合成酶（eNOS ）的表达； （3 ）流式细胞仪计数法测定各组幼兔血浆内皮微颗粒 （CD62E+EMPs、CD105+ EMPs、CD144+/CD42b-EMPs ）的表达水平； 结果： 1. 组织病理学结果：模型组和辛伐他汀干预组均出现不同程度的炎症浸润。模 型组可见血管内膜局部明显增厚，冠脉内皮不连续；而辛伐他汀干预组幼兔冠状动脉 炎性细胞浸润较轻，内膜增厚不明显；对照组冠脉内皮光滑连续。 2. eNOS 水平：辛伐他汀干预组eNOS 表达水平低于模型组，P ＜0.05，差异有 统计学意义；辛伐他汀干预组eNOS 表达水平与对照组相比，P ＞0.05，差异无统计学意 义。 3. 辛伐他汀干预组KD 幼兔急性期、亚急性期、恢复期血浆EMPs 表达水平与 模型组和对照组的比较： II 内皮保护剂治疗川崎病的作用及机制研究 中文摘要 （1） 辛伐他汀干预组及模型组三种表型的EMPs 表达水平均高于对照组，P ＜ 0.01，差异有显著的统计学意