缺血后适应对糖尿病大鼠再灌注心肌的保护作用及其与P-Akt关系.pdfVIP

·中文论著摘要· 缺血后适应对糖尿病大鼠再灌注心肌的保护作用及其 与P．Akt的关系 目 的 缺血后适应与缺血预适应相似，是机体对缺血性损伤的一种自然保护机制， 二者有部分效应器及信号转导途径相似，如P13k．Akt途径，细胞外信号转导途径， 并且二者均可通过抑制mPTP孔开放而保护心肌。本实验探讨缺血后适应对糖尿 病大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响及其信号机制。 材料与方法 l、实验动物 由中国医科大学实验动物部提供，均为2W龄健康SD大鼠，雌雄不拘，体 重250．3009。 2、实验分组 ①空白对照组(N组)；②缺血再灌注组(IR组)；③缺血后适应组(Post组)； ④糖尿病大鼠后适应组(Dpost组)；⑤糖尿病大鼠缺血再灌注组(DIR组)；⑥糖 尿病大鼠空白组(DN组)。每组均随机抽取大鼠10只。 3、糖尿病大鼠模型制作方法 时后断尾法连续两次测血糖16．65mmol／L，并出现多饮、多食、多尿、体重减 轻，脱毛等表现是确定糖尿病模型成功。 4、离体心脏模型建立方法 所有大鼠均采用10％水合氯醛腹腔注射麻醉，开胸前5rain腹腔注射肝素 中，轻轻挤压心脏排出心腔内的积血，迅速主动脉插管将心脏固定于Langendorff 非循环大鼠离体心脏灌注系统。此后整个实验过程均以含95％02和5％C02的K till 一H液进行灌注，灌注压恒定为80H20(7．84mmHg)，心脏灌注温度维持在 36℃。 5、心肌标本采取时间、部位及其保存方法 各组心肌标本均在平衡灌注结束后，取下心脏于冰台上将心脏剪成黄豆粒大 小置EP管中，于．70C冰箱中保存备westernblot用，同样方法取心尖部1—3用戊 二醛固定后备电镜用。 6、检测指标 心脏冠状动脉灌流量、心肌梗死范围的测定、免疫印迹(westernblot)对P．Akt 的测定、电镜下观察心肌和线粒体的改变。 7、统计学处理 l 应用SPSS 1．O统计软件包对数据进行处理。计量数据用均数4-标准差(X4-S) 表示，组间比较采用方差分析，率比较采用#检验，检验水准萨o．05。 结果 均为(4．164-0．31)mmol／L．两组大鼠血糖浓度差异有显著性意义(P0．01)； 2、测定再灌注开始时第2、10、120分钟的冠状动脉流量，在第2分钟时的 计学意义(P0．05)。 肌梗死范围相比有统计学意义(P0．05)。糖尿病大鼠较健康大鼠缺血再灌注组 心肌梗死范围大且有统计学意义(Po．05)。 4、免疫印迹(western 5、在IR组和DIR组可见明显的肌丝断裂与广泛的线粒体空泡改变；在Post 组和Dpost组心肌纤维和线粒体的完整程度均比取组和DIR组要好。 ：日结论’匕 缺血后处理在糖尿病大鼠离体心脏也同样有保护作用，这一作用可能与Akt 2 激活有关。 关键词 缺血后适应 心肌保护 糖尿病大鼠 缺血再灌注P-Akt ·英文摘要· The effectofthe ischemic protective myocardial on postconditioningischemic—reperfused and P—Akt diabeticrat theirRelationwith (I／R)of Bacground andischemic