胆汁中K-ras、p53基因突变检测对胆管癌与胆管良性狭窄鉴别诊断价值研究.pdf

摘要 摘 要 研究背景 胆管癌是危害人类健康的胆道疾病，恶性程度高，早期诊断率低，预后极差。 特别对于那些不典型的病例，与胆管良性狭窄鉴别诊断困难，可能并不能做出明 确的定性诊断，进而对治疗方案的选择产生影响．因此如何鉴别胆管癌与胆管良 性狭窄对尽早选择方案，早期治疗及延长病人生存期具有重大意义。 随着分子生物学技术的发展，对胆管癌的发生发展和生物学行为的研究已进 入基因水平。因此，对胆汁中的肿瘤相关基因进行分析为胆管癌的特异性诊断 提供了可能。与胆管癌相关的基因中，以癌基因K-ras和抑癌基因p53的研究最 广泛深入．目前，对于胆道恶性肿瘤患者胆汁中K-ras基因或p53基因突变情况 的研究并不太多，且效果具有一定局限性。因此联合检测胆管癌患者胆汁上清 液及沉淀中K-ras基因和p53基因突变情况可以完善胆管癌的分子生物学研究。 同时对比胆管良性狭窄来评估基因分析的临床有效性。 研究目的 探讨联合检测胆汁离心后上清液和沉淀物中K-ras基因和p53基因突变对胆 管癌诊断的敏感性及特异性，对胆管癌及胆管良性狭窄鉴别诊断的价值。以及 上清液和沉淀物中基因突变检测结果是否有所不同。 材料与方法 1．收集天津市第一中心医院、天津市南开医院、解放军二五四医院等医院的 胆汁标本30例，其中正常胆汁lO例，胆管良性狭窄患者胆汁lO例，胆管癌患 者胆汁10例。将胆汁样品离心后分别对上清和沉淀立即进行DNA提取。 检测基因突变。对异常泳动条带进行DNA测序。 结果 1、正常胆汁样品的上清及沉淀中均未检测到基因突变。 2、胆管良性狭窄患者胆汁样品的上清及沉淀中均未检测到基因突变。 3、胆管癌患者胆汁样品中，上清中检测到p53及K．rfls基因突变率分别为 摘要 上升为60％。 结论 l、正常胆汁及胆管良性狭窄患者胆汁样品中均未检测到基因突变。 2、胆管癌胆汁上清液的K．ras基因p53基因突变率要高于沉淀的突变率。 3、联合检测胆管癌的胆汁上清液及沉淀中K．ras基因与p53基因突变率可加 强胆管癌的基因诊断。 关键词： K-ras p53胆管癌基因突变PCR．SSCP Abstract ———————————————————————————————————————————一_一一 Abstract Background Carcinomaof bileductisaharmfuldiseasetohuman biliary healthy．The degree of is rateof malignancyhigh．The early islow．Andthe stagediagnosis is prognosis thecases range．In thatisnot particular，for isdifficultto typical，it indentificate carcinomaofbileduct diagnosis andbile duct stenosi