紫外分光光度计使用时应注意的问题.docVIP

紫外分光光度计使用时应注意的问题 4.2测试准备? 4.2.1打开电源开关前，检查一下样品室内除比色皿架外，不应有其它东西遗留。? 4.2.2打开电源开关，预热十五分钟左右。? 4.2.3仪器自动进入初始化，约等待10分钟。初始化后，显示器指示220nm，绘图仪打印出“UV-VIS??SPECTROPHOTOMETER??MODEL??756MC”。? 4.3测试过程? 4.3.1先按“GoToλ”键，再输入相应波长，按“ENTER”键，波长设置完毕，此时显示器指示所输入波长数。? 4.3.2先把各被测试样依次倒入比色皿中，其中一只存放参比试样。试样高度一般为比色皿高度的2/3-3/4，然后依次（一般参比放在靠身第一只）平稳的放入样品室内的比色架中，并随手将样品室盖上。? 4.3.3按“ABSO/100T%”键，吸光度调零。? 4.3.4拉动试样选择杆，依次测定各个试样，并按“START/STOP”键打印出结果。 ?4.4测试结束? 4.4.1取出比色皿，擦净样品室，放入干燥剂，并关闭样品室盖。?4.4.2关闭仪器电源，盖上仪器防尘罩。?4.5附注? 4.5.1比色皿使用完毕，请立即用蒸馏水或有机溶液冲洗干净，并用柔软清洁的纱布将水渍擦 1、使用范围? 凡具有芳香环或共轭双键结构的有机化合物，根据在特定吸收波长处所测得的吸收度，可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定。? 朗伯-比耳定律?A?=ECL? 2、注意事项? ①空白溶液与供试品溶液必须澄清，不得有浑浊。如有浑浊，应预先过滤，并弃去初滤液。? ②测定时，除另有规定外，应以配制供试品溶液的同瓶溶剂为空白对照，采用1cm的石英吸收池。? ③在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个点的吸收度，以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确，除另有规定外，吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内；否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的准确度，并以吸收度最大的波长作为测定波长。? ④一般供试品溶液的吸收度读数，以在0.3～0.7之间的误差较小。? ⑤吸收池应选择配对，否则要引入测定误差。在规定波长下两个吸收池的透光率相差小于0.5%的吸收池作配对，在必要的情况时，须在最终测量扣除吸收池间的误差修正值。 6 若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“100%”点。然后再测量。 高效液相色谱仪操作步骤：??? 1)．?过滤流动相，根据需要选择不同的滤膜。?? 2)．?对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。?? 3)．?打开HPLC工作站（包括计算机软件和色谱仪），连接好流动相管道，连接检测系统。?? 4)．?进入HPLC控制界面主菜单，点击manual，进入手动菜单。?? 5)．?有一段时间没用，或者换了新的流动相，需要先冲洗泵和进样阀。冲洗泵，直接在泵的出水口，用针头抽取。冲洗进样阀，需要在manual菜单下，先点击purge，再点击start，冲洗时速度不要超过10?ml/min。?? 6)．?调节流量，初次使用新的流动相，可以先试一下压力，流速越大，压力越大，一般不要超过2000。点击injure，选用合适的流速，点击on，走基线，观察基线的情况。?? 7)．?设计走样方法。点击file，选取select?users?and?methods，可以选取现有的各种走样方法。若需建立一个新的方法，点击new?method。选取需要的配件，包括进样阀，泵，检测器等，根据需要而不同。选完后，点击protocol。一个完整的走样方法需要包括：a.进样前的稳流，一般2-5分钟；b.基线归零；c.进样阀的loading-inject转换；d.走样时间，随不同的样品而不同。?? 8)．?进样和进样后操作。选定走样方法，点击start。进样，所有的样品均需过滤。方法走完后，点击postrun，可记录数据和做标记等。全部样品走完后，再用上面的方法走一段基线，洗掉剩余物。?? 9)．?关机时，先关计算机，再关液相色谱。?? 10)．?填写登记本，由负责人签字。??? 高效液相色谱仪使用注意事项：? 1、泵正常工作时，在流动相和流速不变的前提下柱压应该是稳定的，当然在换流动相时压力变化是正常的，正常情况下如果柱压升高基本上都是由色谱柱使用时间长引起的（只有更换色谱柱），如果正常情况下压力突然降低有可能是（1）接头处有漏液的地方，采取的方法是有滤纸检查，如有漏液的地方用扳手拧紧即可。如果没有漏液则可能是（2）白色的管子里面有气泡从而导致流动相进不到泵里面去，采取的方法是排气泡排气时：先STOP停泵—打开排气阀—按PURGE（快冲）键—等气泡排完后先STOP停泵—拧紧排气阀，其先后步骤不要搞反了。? 2、泵正常工作时最高压力最好不要超过200KG，所以打开泵以后可以将泵的最大压力调