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《Yeast_Two-Hybrid_System_User_Manual_clontech公司酵母双杂交试剂盒说明手册》.pdf
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Matchmaker™ Gold
Yeast Two-Hybrid System
User Manual
United States/Canada
800.662.2566
Asia Pacific
+1.650.919.7300
Europe
+33.(0)1.3904.6880
Japan
+81.(0)77.543.6116
PT4084-1 (PR033493)
Clontech Laboratories, Inc. Cat. No. 630489
A Takara Bio Company
1290 Terra Bella Ave. Published 30 March 2010
Mountain View, CA 94043
Technical Support (US)
E-mail: tech@
Matchmaker™Gold Yeast Two-Hybrid System User Manual
Table of Contents
I. Introduction Protocol Overview 4
II. List of Components 7
III. Additional Materials Required 8
IV. General Considerations Regarding Yeast Two-Hybrid Libraries 9
V. List of Abbreviations 10
VI. Control Experiments 11
A. General Considerations 11
B. Protocol: Control Mating Protocol 11
VII. Cloning and Testing Bait for Autoactivation and Toxicity 14
A. Generate a Bait Clone 14
B. Detecting Bait Expression 15
C. Protocol: Testing Your Bait for Autoactivation 15
D. Protocol: Testing Your Bait for Toxicity 16
VIII. Two-Hybrid Library Screening Using Yeast Mating 17
IX.Analysis of Results 21
A. Too Few Positives 21
B. Too Many Positives 21
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