《土壤中硝氮、氨氮测定方法》.doc

（七）沉积物磷形态测定方法-SMT 方法概述： SMT (The Standards,Measurements and Testing Programme) 是欧洲标准测试委员会框架下发展的淡水沉积物磷形态分离方法，是一种标准测试程序。对于在湖泊修复中水质的监测和水资源领域的管理，尤其是在至关重要的实验室分析过程的质量保证和数据可比性中是一种很有价值的工具。研究表明，对沉积物中磷形态与其沉积物的理化性质(有机质、主要氧化物组成)之间的关系可用来推断沉积物中磷的特性。前人利用SMT方法发现消落带土壤中活性磷组分与河流沉积物中活性磷组分与相比较高，在适宜的环境条件下会成为水体的二次污染源。目前，已应用SMT法分析沉积物中磷分布特征、各形态磷之间的关系以及与沉积物的某些理化性质之间的相关关系等。 1、方法原理 利用土壤、沉积物中各种形态的无机磷酸盐具有不同浸提能力的化学浸提浸提剂，将无机磷酸盐加以逐级分离。 图 1淡水沉积物磷形态分离SMT法 摘自：金相灿,庞燕,王圣瑞,周小宁. 长江中下游浅水湖沉积物磷形态及其分布特征研究 [J]. 农业环境科学学报2008,27(1):279-285. 2、需要的设备与实验条件 紫外分光光度计、高压灭菌锅 3、所需试剂及操作步骤 （一）所需要的试剂 （1）5N H2SO4：70mL浓硫酸-500mL水中，置于常温下保存； （2）酒石酸锑钾溶液：准确称取1.3715g酒石酸锑钾于500mL容量瓶中，溶解定容，充分摇匀后将该溶液贮存在棕色或其他试剂瓶（玻璃瓶）中，将其置于4℃下保存。 （3）钼酸铵溶液：准确称取40g钼酸铵于1000mL容量瓶中，加适量水待其完全溶解后加水稀释至刻度线，充分摇匀后将该溶液贮存在棕色或其他试剂瓶（玻璃瓶）中，将其置于冰箱中于4℃下保存。 （4）抗坏血酸溶液：准确称取17.6g抗坏血酸1000mL容量瓶中，加适量水待其完全溶解后加水稀释至刻度线，充分摇匀后将该溶液贮存在棕色或其他试剂瓶（玻璃瓶）中，将其置于冰箱中于4℃下保存。 （5）磷酸盐贮备溶液：将优级纯磷酸二氢钾（KH2PO4）于110℃干燥2h,在干燥器中放冷。称取0.2197g溶于水，移入1000mL容量瓶中，加（1+1）硫酸5mL,用水稀释至标线。此溶液没毫升含50ug磷。 （6）磷酸盐标准溶液：吸取10.00mL磷酸盐贮备液于25mL容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含2.00ug磷。临用时现配。 （7）3.5mol·L HCl：用量筒取294 mL HCL于1000mL容量瓶中，加水稀释，待其冷却后稀释至标线；然后将其转入玻璃瓶中保存。 （8）显色剂：显色剂按以下比例配置；5N H2SO4酒石酸锑钾溶液：钼酸铵溶液：抗坏血酸溶液=10:1:3：6；即要配100mL显色剂需取50mL 5N-H2SO4,5mL酒石酸锑钾溶液，15mL钼酸铵溶液，30mL抗坏血酸溶液.混合后最多只能保存4h. 校准曲线的绘制：取7支具塞比色管，分别加入磷酸盐标准使用液0、0.25、0.5、1.5、2.5、5、7.5加水至50mL。向具塞比色管中加入8mL显色剂充分混匀，放置10分钟。用10mm比色皿，于880nm波长处，以零浓度溶液为参比，测量吸光度； （二）测定操作 称取0.2g 样品加20mL 1mol/L NaOH 振荡16h 后离心, 取10mL 上清夜加入4mL 3.5mol/L HCl 静置，16h后离心， 钼锑抗比色法测定磷含量，得到铁/铝/锰结合态磷 (NaOH-P)； 1mol/L NaOH 提取后的残渣用饱和NaCl 溶液清洗后，加入20mL 1mol/L HCl 振荡16h 后提取钙结合态磷 (Ca-P)； 称取0.2g 样品加20mL 1mol/L HCl 振荡16h 后提取无机磷 (IP)； 残渣用去离子水洗涤两次，冷冻干燥，超声浴30s，于450℃马弗炉中灰化3h，加20mL 1mol/L HCl 振荡16h 后提取有机磷(OP)； 4、需要注意的要点 （1）在将样品移入离心管的过程中，应将干锅用提取液冲洗三遍，以防样品残留于干锅中影响实验结果。 （2）在使用离心机的过程中中应将托盘两边重量应一样，以使之保持平衡。 （3）测样过程中应用超纯水或酒精冲洗玻璃比色皿，将皿差调至0.000在进行比色，比色过程中比色皿还应擦干净，以减小测量误差； （4）比色皿用后应用超纯冲洗干净再浸泡于水中。 （十七）沉积物中提取方法 方法概述： 溶解性有机氮(Dissolved organic nitrogen, DON)是湖泊生态系统氮循环的重要组成部分湖泊水体DON的重要来源沉积物释放DON含有较大的易分解组分，并且与沉积物可溶性无机氮、有机质、CEC等有显著相关关系。目前主要是对沉积物DON含量和结构分布特征