巴戟天中一种多糖的分离与结构表征.pdfVIP

Vo1．30 高 等 学 校 化 学 学报 NO．12 2009年 12月 CHEMICALJ0URNALOFCHINESEUNIVERSITIES 2391～2395 巴戟天 中一种多糖的分离与结构表征 何传波 ，李 琳 ，汤凤霞 ，熊何健 (1，集美大学生物工程学院，厦门361021；2．华南理工大学轻工与食品学院，广州510640) 摘要 以巴戟天的根为原料，经热水浸提、Sevag法除蛋 白、乙醇沉淀和DEAE—SepharoseCL-6B离子交换柱 层析，得到一种水溶性的巴戟天多糖 (MOPI一3)．通过uV、IR、NMR、GC—Ms、高碘酸氧化、Smith降解和甲 基化等物理化学方法对MOPI一3的纯度、理化性质和组成结构进行表征．结果表明，MOPI-3分子量为36061， 是一种由阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖组成的杂多糖，以 一1，3-吡喃葡萄糖和d．1，4-吡喃半乳糖为主链，平均 每5个葡萄糖连接一个半乳糖，每个重复单元具有一个支链 ，支链 由3个呋喃阿拉伯糖以 —l，3-键型组成， 连接在主链葡萄糖的6位碳上，MOPI一3含有乙酰基，连接在主链半乳糖的2位碳原子上． 关键词 巴戟天；多糖；分离；结构表征 中图分类号 0629；Q539；Q946．3 文献标识码 A 文章编号 2009)12-2391-05 巴戟天(MorindaofficinalisHow)为茜草科多年生藤本植物，又名巴戟，肉质根可入药，是我国著名 的 “四大南药”之一，主要分布在我国南方的广东、福建及广西等省．其味甘辛，性温补，有补肾阳、强 筋骨及祛风湿的功效，用于阳痿遗精、月经不调、风湿痹痛和筋骨痿软等症…．近年来，在抗抑郁、抗 氧化及增强免疫力的治疗中也是最常用的中药之一 ．目前从巴戟天中分离到的化合物主要包括氨 基酸、蒽醌类、三萜类、有机酸、生物碱和黄酮类等成分 ，对于其中糖类成分的研究，目前仅有崔 承彬等 分离到了4种菊淀粉型低聚糖，Zhong等 证实了这些低聚糖具有抗抑郁活性．而对其中的 多糖成分，仅有少量粗多糖提取及活性的研究，尚未见关于单体组分的报道．本文以巴戟天为原料， 通过 IR、NMR、GC—MS、高碘酸氧化及甲基化分析等物理化学方法，对离子交换层析得到的一种多糖 的化学结构进行分析，为其高级结构的分析和构效关系的研究提供依据． 1 实验部分 1．1 材料、试剂与仪器 巴戟天，购 自广东省德庆县，经广东省药学院药用植物与中药鉴定学教研室鉴定为三年生正品； DEAE—SepharoseCL-6B，SephadexG-100和 SephadexG一15为Phamacia公司产品；Bluedextran系列多糖 为Fluka公司产品；氢化钠、硼氢化钠和标准单糖为Sigma公司产品；其余试剂均为国产分析纯． 德国Sigma公司 3K3D高速冷冻离心机；日本岛津uV一120紫外一可见分光光度计；德国Bruker Tensor37红外光谱仪；德国ChristALPHA24冻干机；美国Waters高效液相色谱仪(配Waters2410示 差折光检测器)；美国VarianCP一3800气相色谱．Satum2200质谱联用系统；德国Bruker公司AVANCE 400Digital超导核磁共振仪． 1．2 实验方法 1．2．1 提取-9分离纯化 将巴戟天粉碎过筛，经热水浸提、抽滤、减压浓缩、乙醇沉淀、离心、Sevag 法脱蛋白 、脱色及冷冻干燥，得到巴戟天粗多糖样品MOP．称取一定量的MOP，溶于Tris．HC1缓冲 液后，用DEAE-SepharoseCL-6B柱( 2．6cm，40cm)分离，再依次用不同NaCl浓度的 sHC1缓冲 液洗脱(流速 1．5mL／min)，5min／管分部收集，苯酚．硫酸法检测490nm处的吸光度值．合并洗脱液， 透析、浓缩并冷冻干燥．将样品溶于NaC1溶液 中继续经 SephadexG．100柱( 1．0cm，100cm)纯化， 收稿 日期：2009-04-09． 基金项 目：国家 自然科学基金(批准号：2O43602O)和广东省科技攻关项 目(批准号：2O03C1O4O25)资助． 联系人简介：何传波，男，博士，讲师