鼻咽癌细胞中miR-10b调控通路初步及研究.pdfVIP

of mRNA 2．DelPozzo J．Control HLA—DRA G，CiuUoM，AutieroM，Guardiola nue|eo—cytoplasmic 1994． interactionof8retentionwith BioL by signal partitioning compartmentalizedproteins．J．MoL 240：193—204． II B，Zier ofMHCclass 3．CaplenHS，SalvadofiS，GansbaeherKS．Post—transcriptionalregulation inhumanT IIHinunoL ．expression cells．Cell 1992．139：98—107 and within 4．BegoviehAB，MoonsamyPV，MackSJ，etal．Geneticvariabilitylinkagedisequilibrium of theHLA—DP 15different region：analysis populations．Tissue 1I 5．Hildesheim AssociationofHLAClassIandAlleles Chen，etaL A，RaymondJ．Apple，Chien—Jen and With Carcinomain NailCancer Dee Extended Taiwan．J HaplotypesNasopharyngeal Inst，2002 4，94 23 ：1780—1789． 6．Goldsmith HLAassociations carcinomainSouthern DB，WestTM，MortonR，etaL with煳pharyngeal Allied Chinese：a Sci，2002，27 1 61-67． meta—analysis。ClinOtolaryngol 7．Xinlan Nucleotide inthe ofHLA L，BinL，eta1．Single F，Dongming polymorphismsregulatoryregion —DRB—expressedgenes．HumanImmunology，2005，66：290-294． 基金项目：广东省科技计划项目 座机电话号码01007 作者单位：1广东药学院附属第一医院耳鼻咽喉头颈外科，座机电话号码中山大学附属第二医院耳鼻咽 喉头颈外科，座机电话号码中山大学生命科学院 通讯作者：邹华，Email：zouhua28@163．com 鼻咽癌细胞中miR—lOb的调控通路的 初步研究 李刚‘ 李湘平刘雄鲁娟王路陈顺金 南方医科大学南方医院耳鼻咽喉一头颈外科广州510515 宰邮箱：climbed999y@yahoo．coin．en手机：1座机电话号码62 摘要：目的：鼻咽癌具有强烈的转移倾向。LMP—l是鼻咽癌最重要的促转移基因。肿瘤转移离不 达，正是由转录因子Twist启动的Twist在鼻咽癌的转移中也发挥重要作用。据此我们提出研究假 说：miR一10b受LMP一1／Twist信号通路调控，在鼻咽癌进展过程中发挥促进转移的功能。 法转染含有N—LMP—l 细胞仪分选出GFP + 细胞扩大培养。RealPeR检测miR一10b表达水平。富集分子量小于 130 200nt的小分子RNA。以cDNA为模板，进行逆转录反应，U6RNA作为内对照，通过荧光定量 PCR对miR一10b表达进行定量分析。采用肿瘤细胞基底膜穿透实验系统，对穿膜生长的细胞进 行计数，分析LMP—l和Twist表达变化对鼻咽癌细胞体外转移能力的影响。 达存在显著差异 P 0．000 ，具备转移能力的C666一l细胞表达水平高于不转移的鼻咽癌细胞。 C666／LMP—l细胞LMP一1 LMP一1通过Twist基因诱导miR一10b表达。Twist 结论：LMP—l通过Twist诱导miR—lOb的表达促进鼻咽癌转移。 Twist 关键词：miRNA鼻咽癌转移潜伏膜蛋白一1 正文 鼻咽癌是中国南方和东南亚地区最常见的恶性肿瘤之一，以明显的区域分布特征、与EB病毒的 密切关系以及强烈的转移倾向显著区别于其他头颈部肿瘤。转移是鼻咽癌治疗失败的主要原因，尽 管诊疗技术不断进步，但由于60—85％的患者确诊时已发生临床转移，鼻咽癌的5年生存率提升缓 慢，探究鼻咽癌转移的分子机制，寻找新的治疗靶点，减少转移的发生，是我们面临的巨大挑战。 LMP一1是鼻咽癌最重要的外源性癌基因，也是鼻咽癌最重要的促转移基因。在鼻咽癌中， 的几乎每个环节。沉默IMP—l能够减少鼻咽癌细胞转移。 人类基因