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HPLC法测定匹多莫德含量及其有关物质 作者：朱永琴1，景爱华2，雷万军2 作者单位：1.河南省食品药品检验所，河南郑州 450003　2.河南科技大学医学技术与工程学院，河南洛阳 471003 【摘要】目的建立HPLC法测定匹多莫德分散片中匹多莫德含量及其有关物质的方法。方法色谱柱：Eclipse Plus C18(4.6 mm ×250 mm,5 μm);流动相：0.01 mol/L磷酸二氢钠溶液-甲醇-异丙醇(97∶2∶1);流速：1.0 mL/min;柱温：30℃;检测波长：210 nm。结果　此方法在0.05～20.0 mg/mL范围内线性良好，回归方程为A=21624C+15621(r=0.9999)，最小检出量为0.5 ng;匹多莫德与酸、碱、过氧化氢氧化产物均有良好的分离;供试品溶液在6 h内稳定。结论　本方法简便、灵敏、专属性强，适用于匹多莫德分散片的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法;匹多莫德;有关物质 Abstract：Objective　To establish HPLC method for determination of Pidotimod and its related substances.　Methods　Eclipse Plus C18 (4.6 mm ×250 mm， 5 μm)column was adopted with the mobile phase of 0.01 mol/L sodium dihydrogen phosphate solution-methanol-isopropyl alcohol(97∶2∶1)at a flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 210 nm.　Results　The calibration curve was linear in the range of 0.05～20.0 mg/mL (r=0.9999).The limit of detection for the assay was 0.5 ng.　Conclusion　The method is simple，accurate and sensitive， and can be used to determine Pidotimod and its related substances. Key words：HPLC; Pidotimod; related substances 匹多莫德是一种人工合成的免疫刺激剂，虽无直接杀菌及抗病毒作用，但可增强特异性及非特异性免疫功能，临床用于防治儿童反复发作的呼吸道感染，慢性支气管炎等。匹多莫德分散片现行质量标准收载于《中国药典》2005年版二部，其含量测定采用紫外分光光度法，未控制其有关物质。本文参考有关文献，建立了高效液相色谱法测定匹多莫德分散片含量及其有关物质的方法，结果准确可靠， 方法准确、高效、简便、快速。 1　材料与方法 1.1　仪器及试剂 Waters 2695高效液相色谱仪;Agilent 8453 紫外可见分光光度计;DELTA-320 pH计;匹多莫德分散片对照品(开封制药(集团)有限公司提供，供含量测定用，批号： 050303，含量：99.5%);匹多莫德分散片(开封制药(集团)有限公司生产，批号20050602规格：0.4 g/片);甲醇、异丙醇均为优级纯;水为高纯水。 2　方法与结果 2.1　色谱条件 采用Waters 2695液相色谱仪;色谱柱： Eclipse Plus C18(4.6 mm×250 mm， 5 m);流动相：0.01 mol/L磷酸二氢钠溶液-甲醇-异丙醇(97∶2∶1);流速： 1.0 mL/min;柱温：30℃;检测波长：210 nm，进样量：5 μL。 2.2　溶液配制 精密称取匹多莫德对照品适量(约25 mg)，置25 mL量瓶中，加流动相超声溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液;精密量取上述溶液1 mL置10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为含量测定对照品溶液。取匹多莫德分散片20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于匹多莫德12.5 mg)，置25 mL量瓶中，加流动相超声溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量续滤液取2.0 mL置10 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得含量测定供试品溶液。 精密称取本品细粉适量(约相当于匹多莫德12.5 mg)，置25 mL 量瓶中，加流动相适量，振摇使溶解，用流动相稀释至刻度