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古尼虫草无性型的分子鉴别
24 3344~348, 2005
Mycosystema
*
410081
PCR rDNA ITS Cordyceps gunnii
Paecilomyces
gunnii
rDNA ITS
Q939.5 A 1672-6472200503-0344-0348
Cordyceps gunniiBerk.Berk.
1983
1985
Paecilomyces gunnii Z.Q. Liang ;
1997
DNA
rDNA 18S 25S
ITS
ITS
1
1.1
Cordyceps gunnii Paecilomyces gunnii
Berk. Berk.
Z.Q. Liang 1985
1.2
1.2.1 DNA SDS--Lysbuffer (
) Tris-HCl pH7.6 1 mol/L 5% NaCl 5 mol/L 2%; EDTA pH8.0 0.5 mol/L
20%]K 20g/L10% SDS () 10%
1.2.2
1 TAE pH7.6 2.5 mL Tris-HCl 5 mLEDTA
pH 250 mLEB 0.5 mg/L0.25%40%
01B010
* E-Mail:chenzuohong@263.net
2005-02-282005-05-10
3 345
1.2.3
PCR PCR 10 buffer dNTP MgCl2 Taq
DNA
1.3 DNA SDS
SDS DNA Sambrook Russell2001
DNA 4
10µL DNA 2.0 µL 1TAE
3 V/cm 45 min
1.4 ITS
ITS ITS4 + ITS5 ITS4 26S rRNA
5`31-50 5`-TCC TCC GCT TAT TGA TAT GC –3`ITS
5 5`-GGA AGT AAA AGT CGT AAC AAG G-3`
1.4.1 (25µL) 15.75µL l10Buffer 2.5µL2mmol/L dNTP 2.5µL,
25mmol/L MgCl2 1.5µL10 pµL/µL, ITS4 1µL10pµL/µL ITS5 1µLTaq 0.25µL
0.5µL
1.4.2
95 5 min Taq 95 1 min 56 30 s, 7
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