届高三一轮复习课件选-.pptVIP

选修一 生物技术实践 专题一　微生物的利用 1．培养基的概念：人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其生长繁殖的 。 2．培养基的成分：一般都含有水、 (提供碳元素的物质)、 (提供氮元素的物质)和无机盐。还需要满足微生物生长对 、特殊营养物质以及 的要求。 1：为什么倒平板后等平板冷却后要将平板倒置？ 提示：将平板倒置的目的是防止培养皿盖上的水珠滴落到平板上造成污染。 稀释涂布平板法测定微生物的生长情况及应用 可在培养物生长的不同阶段用稀释涂布平板法进行测定。将培养物进行一系列稀释并接种到平板培养，统计培养后平板上的菌落数，就可以计算出原培养物的密度。平板上的菌落应该是彼此分散开的，菌落数最好在30～300个。 计算公式：每毫升的细菌数＝平板上的菌落数×样品的稀释倍数(注：平板上的菌落来自1 mL稀释液) 举例：稀释1000倍的平板上有38个菌落，原培养物含有：38×1000＝3.8×104个细菌细胞/mL。 稀释涂布平板法广泛应用于微生物学的研究。这种技术只统计活菌数，而且需要培养一段时间形成菌落后才能计数。因此，这种方法不宜用于某些食品工业的质量控制，因为有些食品如牛奶易腐败变质，不宜延搁这么长的时间。这时可使用直接的方法，如使用显微镜直接统计细胞的数目。 1．含义：指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 2．关键： 。 1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤：计算→ →溶化→ →倒平板。 2．纯化大肠杆菌的原理：在培养基上将聚集的菌种稀释分散成单个细胞，形成单个菌落，此菌落是由一个细胞繁殖而来的子细胞群体。 3．接种技术——平板划线法和稀释涂布平板法 (1)平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面 操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 (2)稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的 ，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面。 2：平板划线法为什么要把第一次以后的每一次划线的起点放在上一次划线的末端？ 提示：目的是使每一次划线后菌体数目减少，培养之后形成的菌落是由单个菌体繁殖而成。 小贴士 1．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (1)菌种筛选：使用 是唯一氮源的选择培养基培养。 (2)统计菌落数目：常用方法有 、显微镜直接计数法。 (3)设置对照：指设置除了 以外，其他条件都相同的实验，目的是排除实验组中 对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 (4)实验流程：土壤取样→制备 →微生物的培养与观察→细菌的计数。 2．分解纤维素的微生物的分离 (1)纤维素酶的组成：是一种复合酶，至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和 酶。 (2)纤维素酶的作用 (3)筛选方法：刚果红染色法，即通过是否产生 来筛选纤维素分解菌。 (4)实验操作步骤 1．培养基的种类 (1)按物理性质分类 (2)按功能分类 2.培养基的配制原则 (1)目的要明确：根据微生物的种类、培养目的选择不同的原料配制培养基。 (2)营养要协调：配制培养基时要注意各营养物质的浓度和比例、pH要适宜。 3．平板划线操作的注意事项 (1)第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。 (2)灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。 (4)划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 平板划线法几次灼烧灭菌的目的比较 如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是(　　) A. 操作前不用做任何处理 B. 划线操作须在火焰上进行 C. 在5区域中才可以得到所需菌落 D. 在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌 [解析]　每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目减少，以便得到菌落。划线后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境