Syntaxin和Munc18相互的作用与在胰腺β细胞分泌中功能及研究.pdf

摘 要 胰岛素是机体最重要的激素之一, 它调节机体的血糖稳定、促进细胞代谢、调节 细胞的分裂分化和生长发育。胰岛素储存在致密核心大囊泡中，通过囊泡分泌释放 到细胞外。胰岛素的释放需要经过囊泡转运、锚定、启动和融合等多个步骤。Syntaxin 1A (Stx1A)和 Munc18a在囊泡的转运和细胞分泌中发挥着关键的调控作用。然而它 们的调控机制尚有待于进一步的研究。 本论文首先用Confocol和宽场荧光显微镜技术研究了在胰岛素分泌细胞系INS-1 以及非分泌细胞系中国仓鼠卵巢细胞（CHO ）中Stx1A和Munc18a 的胞内定位和相互 作用。结果表明在INS-1细胞膜上Munc18a与Stx1A呈簇状共定位分布，但是不与Stx1A 的氨基端Habc 结构域缺失突变体共定位，表明Stx1A 的Habc 结构域在Stx1A 与 Munc18a相互作用以及Munc18a在膜上定位中起着至关重要的作用。在没有内源性 Stx1A表达的CHO细胞中，EGFP标记的Stx1A不能定位到细胞膜上，即使与Munc18a 共表达也不能定位到细胞膜上，表明Munc18a不足以将Stx1A转运到细胞膜。相反地， 在INS-1细胞中Stx1A的上膜有助于Mu