NO对羟基(·OH)损伤DNA的保护作用.pdfVIP

摘 要 目的： N0是人体内一个重要的生物小分子，同时也是一种稳定的生物自由基，本研究以 N0为研究对象，首次用简易的方法制得的NO饱和水溶液用于体外DNA实验，探索N0 保护·0H诱导的DNA氧化损伤的活性，并研究其保护DNA氧化损伤的作用机制。 方法： 制备N0饱和水溶液：用排水法收集NO(g)后，加入已脱气的蒸馏水制得N0饱 和水溶液。 N0保护·0H诱导的DNA氧化损伤活性的研究：紫外分光光度法分析N0对·0H所致 DNA损伤的修复作用，高效液相色谱法检测N0保护·0H诱导的5种碱基的氧化损伤， N0对·OH所致小鼠HT-22细胞氧化损伤的保护作用。 N0保护·oH诱导的DNA氧化损伤活性的机制研究：用重氮化偶合分光光度法检测 反应液中亚硝酸的存在，以及检测N0清除DPPH·自由基和Fe3+还原能力的实验，探讨 可能的机制。 结果： N0对于·0H诱导的DNA体外氧化损伤有明显的保护作用，呈现出一定的量效关系， IC加值为0．19±0．01mmol／L。通过对比谱图分析得出加入N0后对五种碱基氧化损伤 具有非常有效的保护作用。N0对·0H诱导的腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿 1．13±O．021 伤，提高细胞活力。