《应用于染色体步移的PCR扩增技术的研究进展》.pdf

遗 　传 HEREDITA S ( Beijing) 28 (5) :587～595 ,2006 专论与综述 应用于染色体步移的 PCR 扩增技术的研究进展 1 ,2 1 2 2 1 刘 　博 ,苏 　乔 ,汤敏谦 ,袁晓东 ,安利佳 ( ( ) ) 1. 大连理工大学环境与生命科学院 ,大连 116023 ;2 . 宝生物工程 大连 有限公司 ,大连 116600 摘 　要 :各种建立在 PCR 基础上染色体步移的方法能够根据已知的基因序列得到侧翼的基因序列 。染色体步移技 术主要应用于克隆启动子 、步查获得新物种中基因的非保守区域 、鉴定 TDNA 或转座子的插入位点、染色体测序工 作中的空隙填补 ,从而获得完整的基因组序列等方面 。其方法主要有 3 种 :反向 PCR 的方法 ,连接法介导的 PCR 的方法以及特异引物 PCR 的方法 。文章就各种方法进行举例说明并加以分析比较 。 关键词 :染色体步移 ;反向 PCR ;连接法 PCR ;特异引物 PCR 中图分类号 :Q75 　　　文献标识码 :A 　　　 文章编号 :0253 - 9772 (2006) 05 - 0587 - 09 Pr ogr e s s of t h e PCR Amp lifi c ati on Te c hni qu e s f or Chr om os ome Walkin g L IU Bo 1 ,2 , SU Qiao 1 , TAN G MinQian2 , YUAN XiaoDong2 , AN LiJ ia 1 ( 1. School of Environment al and Biolo gical Science and Technology , Dalian Univer sity of Technolo gy , Dalian 116023 , China ; 2 . Ta KaRa Biot echnolo gy ( Dalian) Co . , Lt d . Dalian 116600 , China) A b s t r a c t :Various PCRba se d metho ds are available for chromo some walking from a known se quence to an unknown re gion . It i s p romi sing in genomerelat ed re search for the following exp eriment s : promot er cloning , obt aining noncon servative p art s of gene s in new sp ecie s , identification of TDNA or transpo son insertion sit e s and filling in gap s or un known chromo some regions in genome se quencing. The se metho ds consi st ed of thre e typ e s : inver se PCR , ligationme diat e d PCR and sp ecific p rimer PCR. In thi s review , we illustrat ed and comp ared the current t echnique