aFGF荧光分子探针基因合成及其表达.pdfVIP

维普资讯 中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology，2005，25(10)：7～11 aFGF荧光分子探针基因的合成及其表达 庞实锋 郑 青 黄亚东 周汝滨 李校垄 (1广东医学院生物学教研室 湛江 524023 2暨南大学药学院生物制药教研室 广州 510632) (3暨南大学医药生物技术研究开发中心 广州 510630 4广东省生物技术与生物药物重点实验室 广州 510630) 摘要 通过 PCR技术和体外DNA重组技术将绿色荧光蛋 白cDNA和酸性成纤维细胞生长因子 cDNA构建成融合基因，克隆到表达载体pEte中，构建成表达茵株 BI21(DE3)／pET3c-GAF。经 IPTG诱导表达，融合蛋 白的表达量 占茵体总蛋 白的25％；DNA测序结果表明设计合成的融合基 因与预期相符。Westernblot结果表明重组蛋 白具有aFGF的免疫原性。经IPTG诱导后的茵体及 蛋 白粗提液在荧光显微镜下可观察到强烈的绿色荧光。融合基因在大肠杆茵中实现 了表达，用