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提取温度对霍山石斛多糖理化性质及肠道粘膜免疫活性的影响 摘 要 本论文以名贵中草药霍山石斛为材料，研究提取温度对多糖提取率、理化 性质以及肠道粘膜免疫活性的影响，并对一种霍山石斛多糖均一组分进行荧光 标记，研究其在肠道粘膜免疫系统中的分布。 利用热水浸提法，通过固定料液比（1:3，m/v ）和提取时间（2 h ），改变 提取温度（40 ℃、60 ℃、80 ℃和 100 ℃）获得四种霍山石斛粗多糖，其提 取率随着提取温度的升高而提高。HPLC 分析显示，霍山石斛粗多糖中主要含 有两组分子量分布的多糖。高分子量的多糖组分 （HMW ），其比例和分子量均 随着提取温度的升高而降低，而低分子量的多糖组分（LMW ）含量和分子量呈 上升趋势。用DEAE-纤维素阴离子交换树脂对霍山石斛粗多糖进行分离，得到 两种组分，其中盐洗组分 （HPSS ）全部为 HMW 多糖组分，主要由 Glc 、Gal 、 Ara 、Man 和 Rha 构成，其单糖组成比例在不同提取温度时变化不大，单糖构 型主要为 β-型。水洗组分 （HPSW ）的主要成分是 LMW 多糖，主要由 Glc 构 成，并可能含有少量的 Gal 、Ara 和 Man ，单糖构型主要为α-型。HMW 多糖热 稳定性较差，随着提取温度的升高而发生降解，而 LMW 多糖热稳定性较好， 随着提取温度的升高其在粗多糖中所占比例逐渐增大。因此提取温度对霍山石 斛多糖理化性质的影响主要体现在改变这两种不同性质组分的比例上。各实验 温度提取的霍山石斛粗多糖均具有较强的肠道粘膜免疫活性，且随着提取温度 的升高活性呈下降趋势。HPSS 的活性强于粗多糖和HPSW ，可能是因为HMW 是主要活性成分，但高温作用导致其活性降低。 霍山石斛均一多糖 HPS 具有有效的肠道免疫活性，能够促进 Peyer ’s 结细 胞条件培养基刺激的骨髓细胞的增殖。研究利用溴化氰活化法成功对 HPS 进行 了荧光标记。结果表明荧光标记不会对HPS 的肠道免疫活性产生显著影响，且 不会产生细胞毒性。HPS 可以进入肠道粘膜系统，并且可以与 Peyer ’s 结内某 些细胞结合。 关键词：霍山石斛 多糖 理化性质 肠道粘膜免疫 荧光标记 Effects of extraction temperature on physicochemical properties and intestinal mucosal immune activities of polysaccharides from Dendrobium huoshanense ABSTRACT In this paper, a valuable traditional Chinese herbal medicine Dendrobium huoshanense was employed to investigate t he effects of extraction temperature on the extraction efficiency, physicochemical properties and intestinal mucosal immune activities of polysaccharides . A homogeneous fraction HPS from D . huoshanense polysaccharides was successfully labeled with fluoresceinamine , which was used to explore the distribution of HPS in intestinal mucosal system. Fitting the ratio of