高发区食管癌危险因素调查同卵双胞胎甲基化的分析.pdfVIP

摘要 高发区食管癌危险因素调查及 同卵双胞胎甲基化分析 硕士研究生： 崔娟 导 师： 王立东 河南省食管癌重点开放实验室 郑州大学基础医学院 郑州450052 摘要 1研究背景与目的 食管癌是世界上最常见的六大恶性肿瘤之一。河南、河北和山西三省交界的 太行山地区是中国，也是世界上食管癌发病率和死亡率最高的地区之一。在世 界上食管癌具有显著的地域性分布差异，尤其在中国的高发区更普遍，提示环 境因素可能在食管癌的发生中起重要作用。吸烟饮酒等环境因素在西方国家已 经证明与90％以上食管鳞癌的发生有关，然而在亚洲或中国不同的研究组发现 吸烟饮酒与食管鳞癌患病风险的关系很不～致。因此，本研究通过大样本量的 流调探讨吸烟饮酒与中国高发区食管癌的风险关系。 环境因素引起DNA损伤主要的分子改变：DNA甲基化。强的环境因素能引起 甲基化，当环境因素消失或者其它因素的影响，甲基化又可恢复正常，基因的 突变、移位或缺失也可引起某些特定部位的甲基化。大量文献报道，抑癌基因 的甲基化异常往往为食管癌发生的早期分子事件，可能作为食管癌早期诊断的 分子标志物。而且甲基化DNA在外周血中较稳定，因此外周血中甲基化异常的 检测具有肿瘤早期渗断的重要价值。 大量研究报道，在不同人群的食管癌组织中采用最常见的技术仅检测一个 基因或数个基因甲基化的频率。这些技术检测位点有限，很难找到关键的甲基 化基因，因此，特异性标志物将来真币用于临床，必须运用高通量的检测技术， 搜寻食管癌候选甲基化位点。 摘要 然而，传统的恶性肿瘤标志物的搜寻和鉴定多数是对一定数量的肿瘤患者和 正常人进行对比，确定肿瘤标志物。这些人群多为散在的个体，从遗传发育角 度讲，在肿瘤发生前，他们之间就有许多差异，这些差异可能大多数纯属个体 差异，与肿瘤发生无关；成年后，这些人群不同程度发生肿瘤，期间出现了新 的肿瘤相关基因改变，但当此时与正常人比较研究时，这种肿瘤相关的差异基 因(极少数)就与遗传发育上的个体差异基因混为一体，给筛查和识别真正的 肿瘤甲基化标志物带来极大困扰。如何降低或缩小这种背景差异，是筛查特异 性食管癌标志物最具挑战性的问题。 本研究一反以往从不同个体搜寻肿瘤标志物的思路，利用独特的同卵双胞胎 食管癌患者作为研究对象，对比分析双胞胎成员中一人患病，另一人J下常的分 子差异，确定肿瘤相关甲基化基因。由于同卵双胞胎理论上出生时遗传背景完 全相同，这就最大程度减小了个体差异所造成的“噪音”基因，为我们获得食管癌 特异性肿瘤标志物提供了独特的途径。 我们通过高通量技术来检测同卵双胞胎中食管癌发生的关键甲基化位点， 寻找与食管癌发生的候选甲基化基因，为进一步阐明甲基化在食管癌发生中的 作用提供理论依据，更为加深对食管癌变分子机制的了解，并为食管癌早期诊 断和高危人群预警提供候选指标。 2材料与方法 2．1研究对象 7548例食管癌患者来自河南、河北和山西三省交界的安阳肿瘤医院、林州 肿瘤医院、长治医学院附属和平医院和磁县人民医院等食管癌高发区，主要是 2006年以后确诊的食管癌病人并均经病理证实为食管鳞状细胞癌；13014例正常 对照来自上述医院的门诊和人群普查对象，主要是2009年以后均经内镜检查排 除食管和胃肿瘤的正常人。 2对男性同卵双胞胎来自河南食管癌高发区，均为单发食管癌患者。2对双 胞胎均抽取3ml抗凝血及食管粘膜病变均经活检组织病理检查确诊。 2．2问卷调查和家访 分别从上述地区收集食管癌病人和J下常对照及双胞胎的资料入户进行家访 和问卷调查，内容包括：个人基本情况、文化水平、烟酒史、肿瘤家族史、生活 II 摘要 习惯和家庭收入等。并进一步从患者就诊医院获得详细临床病理资料。