热敏型载体环吸附释放生物酶催化剂.pdf

摘要 摘要 催化剂可分为均相催化剂与非均相催化剂两大类。均相催化剂的转化率和 选择性通常都较高(转化数的世界纪录：4550000)，但是它回收困难、不易循 环使用。非均相催化剂易与产物分离、易于回收和再利用，但活性与选择性一 般不及相应的均相催化剂。如何实现均相催化剂与非均相催化剂的优势互补 一一既具有均相催化剂的高活性，又具有非均相催化剂的易回收性?这成 为当前催化领域的热门话题。 本文根据人工分子伴侣结合＼释放蛋白质的机理，提出了一种新的解决问题 的方法：在反应状态时，载体与催化剂几乎无相互作用，催化剂均相催化反应； 反应结束后，改变条件使载体吸附催化剂，形成非均相催化剂，易于回收；再 把回收的非均相催化剂投入到新的反应体系中，改变条件使载体将催化剂释放 出来，催化剂继续均相催化反应；如此循环往复。本文成功实现了热敏型载体 Au@PNIPAM循环吸附＼释放生物酶催化剂(木瓜蛋白酶和过氧化氢酶)，证明 了该方法的可行性。 采用柠檬酸钠还原法合成了纳米金粒子，采用RAFT聚合法合成了热敏型 热重和紫外一可见光谱表征证明成功合成了Au@PNIPAM，动态光散射和透射电 镜表征证明Au@PNIPAM具有良好的热敏性。 oC时，载 热敏型载体Au@：PNIPAM对木瓜蛋白酶的吸附率与温度有关。25 体呈亲水性，吸附酶较少：温度升高至50oC，载体呈疏水性，可以吸附超过90．0％ 的酶。再降温至25。C，Au@PNIPAM释放出大部分吸附的酶。此过程可循环进 行。 将“Au@PNIP枞+木瓜蛋白酶”体系投入到水解酪蛋白反应体系中。先在 25oC时催化反应，相对活性达到93．4％。然后升温至50 oC，Au@PNIPAM吸 附大部分酶形成非均相催化剂，从而容易回收。再将回收的固体投入到新鲜的 缓冲溶液中。在25 “Au@PN删+木瓜蛋白酶”体系，继续催化水解酪蛋白，相对活性为83．1％。 进入第三轮反应，Au@PNIPAM释放出62．O％的酶，相对活性为62．6％。 T 摘要 底物过氧化氢，体系的相对活性为98．3％。反应结束后，升温至50oC， ／Au@PNIPAM分离出来，并转移至20oC的新鲜的缓冲溶液中。载体 酶被Au@PNIPAM释放，体系的相对活性超过50％。 Au@PNIPAM中的纳米金仅仅起到一个核的作用，对于循环吸附＼释放催化 剂并无帮助。而且金的价格昂贵，不适于在实际应用中大面积推广。因此，本 文研究用较为便宜的物质替代它，合成了以纳米Si02为核的热敏型载体 也只有36％。Si02@PNIPAM不适合用于循环吸附＼释放催化剂。 此外，本文研究了介孔材料SBA．15固载木瓜蛋白酶的性能。相比于游离酶， 固载在羧基改性SBA．15上的木瓜蛋白酶对底物酪蛋白有更强的亲和力，其催化 有益于提高固定化木瓜蛋白酶的活性。 关键词：均相催化，非均相回收，PNIPAM，木瓜蛋白酶，过氧化氢酶 II Abstract Abstract canbe classifiedintotwo and Catalysts simply types：homogeneous showexcellent world catalystsusually activity(new heterogeneous．Homogeneous buttroublesomea