比较蛋白质定量分析及其在疾病研究中的应用.pdf

复旦史学博士论文 比较蛋白质组定量分析方法及其在疾病研究中的应用 摘 要 蛋白质组学技术是生命科学中的分析化学的主要内容，是当前的研究前沿， 是化学生物学近年来的新研究方向。本论文工作是在建立蛋白质组研究实验室的 过程中，建立和发展了蛋白质组、比较蛋白质组和定量蛋白质组研究的相关技术 平台，并将其应用于人类重大疾病的研究。 定量蛋白质组学是通过某种方法或技术，对生物样品(细胞、组织或体液等) 在某些过程中蛋白质的含量进行比较分析。从蛋白质组水平上对基因表达进行准 确的定量分析，是比较蛋白质组学的重要内容，是当前研究重大疾病致病机制以 及药理控制机制的必要手段及研究前沿。 本论文工作的主要贡献是，建立了一套稳定可靠的蛋白质顺序提取．双向凝 胶电泳分离一半自动胶上酶解-质谱鉴定的高通量技术分析平台；建立了一种新 的、基于肽段乙酰基化的稳定同位素标记定量蛋白质组分析技术，并在实际生物 样品体系中进行了验证；将建立、优化的蛋白质组定量分析技术应用于动脉粥样 硬化、冠-II,病以及肝癌的复发转移相关的多个实际生物样品的比较分析，并从分 子水平上评价了几种药物的药效。本文还研究了对基于生物素．抗生物素蛋白特 异性结合的亲和色谱分离体系，结果显示该体系有望