1、Axin与ankyrase2相互作用关系的初步研究;2、RU486作为PPARr激动剂的性质和功能的研究.pdf

摘要 摘要 Tankyrase是一种进化上保守，多元化的蛋白，它由于被发现能够影响端粒 结合蛋白对端粒的稳定作用，而作为与衰老和癌症密切相关的蛋白，成为继端粒 酶后又一个细胞癌变机制和癌症治疗研究的新热点。Axin则是一种具有多功能 结构域的构架蛋白，它可与多种信号转导途径的重要蛋白相互作用，并以此调控 2(Tnks2)能够通过与Axin相 细胞命运和抑制肿瘤发生。研究发现Tankyrase 互作用，经由泛素．蛋白酶体途径促进Axin的降解而激活Wnt信号通路。同时， 导的葡萄糖转运蛋白Glut4的转座。本论文中，我们从结构生物学的角度对这两 种重要蛋白的相互作用方式进行了研究。我们发现Axin通过氨基端aa1．81与 Tnks2 一 稳定的复合体。我们同时还发现Axin和Tnks2的结合并不是1：1的，应该至少 有2个或2个以上的Axin能同时与Tnks2结合。此前，在已知的为数众多的 Axin相互作用蛋白中并没有发现能够与Axin的aal．81区域结合的蛋白，并且 对结构域进行比对的过程中也没有发现aal．81存在任何已知的功能结构域。其 与Tnks2相互作用的发现无疑为对Axin功能的进一步研究提供了线索。我们还 的蛋白晶体，但是对筛选情况进行的分析为我们今后进一步优化结晶条件提供了 参考。未来我们如果能获得Tnks2／Axin复合体的结晶，就能够对这两种生物大 分子的结构关系进行研究，找出其可能的作用机制，从而为其生理学功能的深入 研究提供参考和依据。 关键词：Axin：Tnks2 l 摘要 Ⅱ PPARy(过氧化物酶体增殖激活受体Y)是配体依赖的转录因子核受体超家 族中的一员。它是一种与代谢相关的重要转录因子，是脂肪细胞分化和糖代谢的 关键调节因子，研究发现它在炎症反应，癌症，动脉粥样硬化，骨形态发生等多 种生理活动中都起着重要的调节作用。广为人知的糖尿病治疗药物TZDs正是 PPARy的一种高亲和性配体。本论文提出并验证了一种独特的PPARy激动剂， RU486。RU486是孕激素受体的配体，目前被大量运用于生殖医学中。我们发 现RU486能够强烈激活PPARy的转录活性，诱导PPARy与辅激活因子的结合， 化为脂肪细胞，但诱导分化能力显著低于rosiglitazone。它还能够激活巨噬细胞 中PPARY的转录活性，从而诱导与脂类代谢相关的目的基因CD36和LxRa的 从另一个角度说明了RU486是通过或者至少足部分通过与PPARy的直接作用 而发挥作用的。此外，从结构生物学角度对PPARY与RU486相互作用分子机 制的研究表明RU486的二甲基苯胺侧链是介导其与PPARy相互结合的关键， 也揭示了其有别于PPARy天然配体及TZD类配体的特异之处。我们的研究不但 为在临床上更加合理有效地应用和发挥RU486的功能并规避其可能的不良反应 提供了重要的参考价值，同时，由于TZDs在糖尿病治疗方面副作用，也为未来 设计非TZD类PPARy新配体，合成能够治疗糖尿病等PPARy介导的疾病的药 物提供了另一种选择。 关键词：PPARy；RU486 2 Abstract Abstract isa conservedandmulti-facetedhasbeen evolutionarily protein．It Tankyrase ahot instudiesof andcancer fordecadessince spot carcinogenesistherapy in whichjsrelatedto itsestablishedfuncti