塔形毛白杨CVBJHR01再生体系的建立及Bt抗虫基因工程的研究.pdfVIP

摘要 摘要 杨树是我国重要的生态防护林与工业用材树种。但是杨树虫害严重，每年因虫害造 成了巨大的经济损失。随着杨树抗虫基因工程的发展，一些重要的抗虫基因，特别是历 基因，已经成功用于杨树病虫害的防治，并取得了丰硕的成果。本研究以华北地区优良 tomentosa 的生产品种塔形毛白杨CV-BJHR01(Populus 化系统的验证、抗虫基因的转化等一系列研究，培育出表达厨蛋白的转基因毛白杨新 品系。具体取得以下结果： (1)对培养基配方、培养条件以及外植体类型进行探索，建立并优化了塔形毛白杨 义，同时为基因工程育种奠定基础，也为促进农林复合生态系统的健康发展提供了科技 支撑。 (2)通过对gus基因的瞬时表达检测，建立并验证了整个遗传转化系统的可行性。 同时对转化体的抗性筛选压进行了摸索，确定了最适的抗生素筛选浓度，为抗虫基因的 顺利转化奠定了基础。 测结果。利用mBt．Cry3AImmunoStrip检验目的抗虫基因在植物体内是否有蛋白表达， ELISA实验 结果表明，64株PCR阳性植株中有12株呈蛋白阳性反应，以mBt．Cry3A 再次验证呈蛋白阳性反应的植株，发现其OD600的吸光度普遍高于对照植株，证明已获 得多个抗虫毛白杨转基因株系。 关键词塔形毛白杨；再生体系；抗虫；历基因；转基因 Abstract Abstract isall of shelterforestandindustrialtimber．Butthe ecological Poplarimportantspecies aresoseriousthatenormousloses the of poplarpests moneyeveryyear．Withdevelopment insect-resistant in insect—resistant engineeringpoplar,someimportant genetic Bt used been for andtreatmentof wehave gene,havesuccessfullyprevention diseases，and achievedsubstantialresults．ne tomentosa Populus Cart．cvBJHR01’，whichissuperior varietiesinNorth usedfitsthematerialinthis China,was modified study．The Bt886cry3Aa aS wastakenthe insect-resistantestablishedthe fortissue gene target genes．We systems culture and finishedthetransformationofinsect- regenerationgenetictransformation，and resistant on newBt of