《实时荧光定量RT_PCR检测禽白血病病毒J亚群》.pdfVIP

1422 2010 11 30 11 Chin Vet S ci Nov. 2010 Vol.30 No. 11 RT-PCR J * 王 峰, 刘 青, 王晓伟, 陈洪博, 于琳琳, 王 玥, 姜艳萍, 成子强 ( , 271018) :将禽白血病病毒J 亚群( ALV-J) NX0101 毒株接种 1日龄和7 日龄SPF 雏鸡并设阴性 照组, 采用实时荧光 定量RT-PCR 方法, 定期检测病毒在体 内的复制情况根据 Gen ank 发表的 ALV-J env 基因保 守序列 ( AY897227) 设计 1 特异性引物扩增目的基因;根据鸡的3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH) 基因序列( K01458) , 在 保守区内设计 1 引物扩增内参照基因,分别克隆入质粒作为标准品制作标准曲线,采用SY R Green染料建立 荧光定量PCR 法, 并 方法的特异性敏感性和重复性进行评价结果显示,标准曲线的 C 值与标准品浓度的t