獭兔生长激素基因克隆及其原核细胞表达的初步的研究.pdf

摘 要 獭兔原产于法国，又名力克斯兔(Rex rabbit)是一种皮肉兼用兔，由于獭兔皮毛酷 似水貂而得名。獭兔体型明显小于肉兔体型，所以獭兔皮张面积将小于肉兔皮张面积。 通过改变獭兔生长发育性能期望提高獭兔体型，从而在不改变獭兔皮毛优质的情况下 提高獭兔的生长速度与体型大小。由于獭兔与肉兔进行传统遗传育种杂交时会破坏后 代的皮毛质量，产生大量针毛，大幅度降低獭兔皮用价值。所以獭兔在生产管理及遗 传育种培养时坚决不能与肉兔进行杂交培养。随着现代科学技术的发展，转基因獭兔 必将成为生产皮用獭兔的一个必然发展趋势。GH (Growth hormone)基因已经在多种动 物体上取得了许多研究成果。 生长激素(GH)是动物脑垂体前叶嗜酸性细胞所分泌的一种激素，它主要作用是刺 激骨、软骨细胞的生长和分化，调节蛋白质、糖以及脂肪的代谢。生长激素(GH)基因 是生长激素(GH) 的遗传物质基础，是重要的生理机能基因，所以对GH 基因的相关研 究一直为人们所关注。 本研究采用RT-PCR 技术克隆得到獭兔GH 基因。通过载体pMD18-T 转化大肠杆 菌DH5α ，经过测序证明成功克隆得到獭兔GH 基因，长651bp，可编码216 个氨基酸 (含1 个END 序列) ，与NCBI 中其他几种常见动物对进行了对比，猪、马、牛、绵羊、 山羊、家猫、家狗同源性分别为93%、92%、88%、90%、88%、92%、91%，说明獭 兔与家庭生长激素基因同源性非常高。使用克隆得到的獭兔 GH 基因与表达载体 pET-32a(+)相连接，转化大肠杆菌BL21(DE3) ，并使其成功表达出一个26KDa 的蛋白， 经过Western blotting 检验，结果呈阳性。 关键词：獭兔；生长激素；GH 基因；基因打靶 Study onRex Rabbit Growth Hormone Gene Cloning and Preliminary Expression of Prokaryotic Cells Abstract Rex originating in France,Rex rabbitis can be used for leather can be used for meat, Rex rabbitis named because fur like mink. The Rex Body significantly less than meat rabbit body, beaver rabbit skin area will be less than the area of meat rabbit hides. By changing the Rex growth and development of performance expectations to improve Rex Body, without changing the quality beaver rabbit hair to improve the growth rate and body size of the Rex. Rex and meat rabbit traditional genetic breeding hybrid will destroy the fur quality of future generations, resulting in a large number of hairs, a significant reduction in beaver rabbit value. Rex in production management and genetic breeding culture is determined not with meat rabbit hybrid culture. With the development of modern science and technology, genetically modified Rex