氨基酸纸层析糖旋光度的测定an.pptVIP

实验五氨基酸的纸层析糖旋光度的测定 1.学习层析（色谱）分离技术。 2.学习旋光度测定技术。 实验目的： 一、氨基酸的纸色谱 色谱法：根据不同溶质在固定相和流动相之间的作用力（分配、吸附、离子交换等）的差别，在随着流动相经过固定相时，在两相之间形成多次平衡，被流动相带动移动的速度不同，达到分离效果的方法。 固定相：固定不动，对样品产生保留作用的物质。 流动相：带动样品，经过固定相的物质。 色谱过程的实质：是样品在固定相中吸附与解析的过程。 按分离机制，可分为： 吸附色谱：分子在两相中吸附性能不同，进行分离 分配色谱：分子在两相中分配系数不同，进行分离 离子交换色谱：分子在两相中离子交换性能不同，进行分离 体积排阻色谱：体积大的留在固定相的小孔内，体积小的先 流出。 亲和色谱：分子在两相中亲和力不同，进行分离。 电泳色谱、电色谱：离子在电场中移动的速度不同进行分离 色谱法分类 按操作方式不同，又可分为： 柱色谱 气相色谱 高效液相色谱 薄层色谱 纸色谱 等 固定相 组分 纸色谱： 为分配色谱，滤纸为载体，固定相为滤纸上的水分，流动相（展开剂）为用水饱和过的有机溶剂。 操作技术：上行法、下行法、环行法 纸色谱、薄层色谱的一般操作步骤 1.制板（纸） 将一个1.5cm 长、1cm 宽的滤纸，剪成扇子状，并卷起来