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专业英语课程论文 题目：大豆胞囊线虫胞囊上生防 真菌的分离、鉴定和分布 导师：李洪连教授 方向：小麦胞囊线虫的生物防治 姓名：张飞跃 班级：2006级研究生 2007年12月20日 大豆胞囊线虫胞囊上的生防真菌的分离、 鉴定和分布 D. G. Kim, R. D. Riggs, and J. C. Correll （阿肯色州立大学植物病理学系 费耶特威尔 72701） 摘要 在1992和1993年间，从美国沿密西西比河和密苏里河的10个州的33个县收集到76种大豆胞囊线虫。在肯塔基州、路易斯安那州、密西西比州和田纳西州的10种胞囊线虫的卵和胞囊上分离到一种未被命名分类、指定为ARF18、并且是大豆胞囊线虫卵的寄生菌的不育丝孢真菌。根据它们在几种培养基上的栽培形态、在玉米粉琼脂培养基上产拟菌核结构(SLS)的能力、生长速度以及离体条件下对大豆胞囊线虫卵的致病力、mtDNA的RFLPs检测，对这次研究中获得的ARF18的10个菌株和以前研究中获得的7个菌株进行了鉴定。所有这17个ARF18菌株在PDA、玉米琼脂和营养琼脂培养基上都很容易生长，基于玉米琼脂培养基上的群体形态和SLS的外观，这些菌株都可以归类到两种形态类型：组成SLS结构的菌丝致密的菌株为ARF18-C，而形成SLS结构的菌丝疏松的菌株为ARF18-L。这两种菌株只在生长速度上有微小的差别。从阿肯色州、路易斯安那州、密西西比州和田纳西州分离到的10个ARF18-C菌株都属于一个独立的mtDNA RFLP单体；而那7个ARF18-L菌株和另外一个都呈现出很多的mtDNA限制性片段条带，都属于三个不同的mtDNA RFLP单体。ARF18的不同菌株在离体条件下对大豆胞囊线虫卵的感染能力有明显差别。准确地说，ARF18-C的一些菌株能够感染大豆胞囊线虫50%（平均值=70.0%, 标准差= 16%）以上的卵；而ARF18-L菌株对卵的感染能力则较小（平均值= 25%, 标准差= 27%）。ARF18-C菌株仅能从北纬37度以下的地区分离到。ARF18菌的存在与下列因素有关：土壤中Mg314 kg/ha、胞囊数4.5/100 cm 3、并且铁203.5 kg/ha；或者Mg 314 kg/ha、Na 121 kg/ha。ARF18菌的广泛分布和它的一些菌株对大豆胞囊线虫卵的侵染能力都表明：ARF18菌作为大豆胞囊线虫的生物防治因子具有潜力。 关键词 种；土壤因子；大豆胞囊线虫 大豆胞囊线虫SCN（Heterodera glycines Ichinohe）起初是在1956年从密西西比河流域的田纳西州和密苏里州发现的，随后在其他一些大豆产区也被发现。1994年，大豆胞囊线虫在沿密西西比河和密苏里河的11个州的500多个县流行。因为化学农药对控制线虫的有用性和危险性受到关注，从而提高了人们对选择生物防治或化学防治策略的兴趣。 1987年，在阿肯色州线虫种群衰退的土壤中分离到一种未被命名的、指定为ARF18的不产孢丝核菌，并表明可以作为大豆胞囊线虫的生防菌。ARF18是一种独特的病原线虫生防真菌，它能直接穿透胞囊壁进入胞囊并杀死卵。直接穿透对于抑制胞囊线虫具有特别的意义，因为胞囊壁是保护卵的屏障。 虽然1987年在阿肯色州分离到ARF18，但它在其他州的分布和分类学还不清楚。ARF18很难形成孢子并且很少有用来鉴别的特性可供利用。在玉米琼脂培养基（CMA）上，ARF18的栽培和形态学特性包括清晰、有隔的带有伏罗宁小体的菌丝(宽4.0 μm)和SLS结构，或多或少紧密填满与丝状菌丝有明显差别的细胞(Fig. 1)。DNA的RFLPs越来越多地用于真菌的鉴定，这些技术对于鉴定未知的和不确定分类的真菌很有利。 这项研究的目的就是为了确定寄生大豆胞囊线虫的ARF18在中美地区的地理分布，鉴别它的生长特性、不同培养基上的栽培特性、致病性、(mt) DNA 的RFLPs，以及对分离到ARF18的田块的土壤特性的分析等。 材料与方法 土壤取样和线虫提取 土壤样品是在1992年秋季和1993年间，在美国中部地区从路易斯安那州到明尼苏达州的大豆田中获取的(Fig. 2)，而这些田块是通过运用便携式胞囊提取器确定有大豆胞囊线虫危害的田块。要确定ARF18存在与否，是在清除掉上层的植物残骸后收集15cm深的土壤大约5千克。土壤样品放进塑料袋中，在4°C条件下处理1个月时间，每个土壤样品分成4份：1千克土用于通过过筛和离心浮选法来确定土壤中大豆胞囊线虫卵的数量；100克土送往阿肯色州土壤测试实验室（费耶特威尔的阿肯色州立大学）用于化学分析；200克土在费耶特威尔的阿肯色州立大学的土壤测试实验室用来做粒度分析；剩余土壤