山菠菜胆碱单氧化物酶基因(CMO)的克隆与分析.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! ! %’(!)(! 年 月 #$$! ! !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( *+,-+. #$$! - 12 / !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 山菠菜胆碱单氧化物酶基因（ ）的克隆与分析 !# 沈义国 杜保兴 张劲松 陈受宜 （中国科学院遗传研究所植物生物技术开放实验室，北京 ） !$$!$! 摘 要 甜菜碱是一类广泛存在于生物体内的渗透保护剂。高等植物中，甜菜碱的生物合成经由胆碱 甜菜碱醛 # 甜菜碱两步反应完成，其中第一步反应，也是甜菜碱生物合成的限速反应，由胆碱单氧化物酶（ ）催化。本研 # ;KL 究以耐盐植物山菠菜（ ）为材料构建了盐胁迫下的 文库，用菠菜 为探针从中筛 3/*#,%5(*/%$# GM)N ;KL GM)N 4 选获得一个长 的 克隆，测序结果表明该克隆包含一个完整的开放读码框，编码一个由 个氨基酸 !OPQ GM)N A42 构成的多肽，与菠菜和甜菜;KL的氨基酸序列同源性分别为2!R和#R。同菠菜和甜菜中的;KL序列相比，山 菠菜 基因（ ）也具有保守的 ［ ］簇结合区和保守的多铁原子核结合域。对盐处理条 ;KL 3!67 7=@FP@0? @#9@0#8 /J 件下山菠菜 基因转录水平的研究表明 基因在盐胁迫情况下表达量增加约 倍。将 与 启动 ;KL ;KL 4 ;KL 4B8 子连接后转化烟草（ ），获得了具有一定耐盐性状的转基因植株，在 的盐浓 8#0/#+$+/+9+0): S+.(T+,I= !O#R)+;’ 度下生长良好。 关键词 山菠菜，甜菜碱，胆碱单氧化物酶，盐胁迫 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） U2 N !$$$04$3!#$$$$!0$$$!0$3 干旱、盐害是生物体面临来自自然界的几种常 们实验室已从山菠菜中克隆了6NMV 基因并进行 见不利因素之一。长期以来的抗逆研究表明，生物 了多种重要农作物的转基因研究，获得了耐盐的转 体内存在着多种机制抵御外界的渗透压胁迫：如通 3.3; 玉米、草莓和具有一定耐盐性状的转3=