脂肪酸对牛骨骼卫星细胞分化的影响.pdf

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脂肪酸对牛骨骼卫星细胞分化的影响

㈣0㈣㈣㈣㈣ 1 曼量量量量鼍舅舅皇皇鼍曼曼量量量量曼曼皇量曼皇量量量量量量量量曼量置量量皇量量量置曼曼曼皇量皇鲁 。一…j曼量曼 580一 —————————————二坠—一Y277 目 录 摘昙要…………………………………………………………………………………………………………………………………………..I 英文摘要…………………………………………………………………………………………………III l:;I言……………………………………………………………………………………………………………………………………….1 1.1脂肪酸…………………………………………………………………………………………………………………………….1 1.1.1脂肪酸的分类………………………………………………………………………………..1 1.1.2脂肪酸的生理功能………………………………………………………………………….2 1.2脂肪酸代谢相关基因结构及功能………………………………………………………………3 1.2.1肉碱棕榈酰转移酶II(CPT2)……………………………………………………………3 1.3MyoG和MYH2基因的结构与功能……………………………………………………………6 1.3.1 MyoG基因的结构与功能…………………………………………………………………。6 1.3.2 MYH2基因的结构与功能………………………………………………………………….7 1.4脂肪酸对骨骼肌卫星细胞分化影响研究进展………………………………………………..7 1.5本研究的目的和意义…………………………………………………………………………….8 2材料与方法…………………………………………………………………………………………….9 2.1主要实验材料…………………………………………………………………………………….9 2.1.1菌株、质粒与细胞………………………………………………………………………….9 2.1.2工具酶、试剂盒和其他试剂………………………………………………………………9 2.1.3主要仪器……………………………………………………………………………………..9 2.1.4分析软件……………………………………………………………………………………10 2.1.5主要试剂的配制……………………………………………………………………………10 2.2实验方法…………………………………………………………………………………………11 2.2.1 1 DH5a大肠杆菌感受态的制备……………………………………………………………..1 2.2.2质粒的小量提取……………………………………………………………………………12 2.2.3载体去磷酸化………………………………………………………………………………12 2.2.4去内毒素质粒的提取………………………………………………………………………13 2.2.5 ELOVL3干扰表达载体的构建……………………………………………………………14 2.2.6牛骨骼肌卫星细胞的原代培养…………………………………………………………..14 2.2.7细胞的冻存与复苏…………………………………………………………………………15 2.2.8细胞总RNA的提取……………………………………………………………………….15 2.2.9 5 cDNA的获得……………………………………………………………………………….1 2.2.10Real.time

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