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脂肪酸对牛骨骼卫星细胞分化的影响
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目 录
摘昙要…………………………………………………………………………………………………………………………………………..I
英文摘要…………………………………………………………………………………………………III
l:;I言……………………………………………………………………………………………………………………………………….1
1.1脂肪酸…………………………………………………………………………………………………………………………….1
1.1.1脂肪酸的分类………………………………………………………………………………..1
1.1.2脂肪酸的生理功能………………………………………………………………………….2
1.2脂肪酸代谢相关基因结构及功能………………………………………………………………3
1.2.1肉碱棕榈酰转移酶II(CPT2)……………………………………………………………3
1.3MyoG和MYH2基因的结构与功能……………………………………………………………6
1.3.1
MyoG基因的结构与功能…………………………………………………………………。6
1.3.2
MYH2基因的结构与功能………………………………………………………………….7
1.4脂肪酸对骨骼肌卫星细胞分化影响研究进展………………………………………………..7
1.5本研究的目的和意义…………………………………………………………………………….8
2材料与方法…………………………………………………………………………………………….9
2.1主要实验材料…………………………………………………………………………………….9
2.1.1菌株、质粒与细胞………………………………………………………………………….9
2.1.2工具酶、试剂盒和其他试剂………………………………………………………………9
2.1.3主要仪器……………………………………………………………………………………..9
2.1.4分析软件……………………………………………………………………………………10
2.1.5主要试剂的配制……………………………………………………………………………10
2.2实验方法…………………………………………………………………………………………11
2.2.1 1
DH5a大肠杆菌感受态的制备……………………………………………………………..1
2.2.2质粒的小量提取……………………………………………………………………………12
2.2.3载体去磷酸化………………………………………………………………………………12
2.2.4去内毒素质粒的提取………………………………………………………………………13
2.2.5
ELOVL3干扰表达载体的构建……………………………………………………………14
2.2.6牛骨骼肌卫星细胞的原代培养…………………………………………………………..14
2.2.7细胞的冻存与复苏…………………………………………………………………………15
2.2.8细胞总RNA的提取……………………………………………………………………….15
2.2.9 5
cDNA的获得……………………………………………………………………………….1
2.2.10Real.time
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