小鼠精原细胞体外存活、增殖特性和冷冻保存研究.pdfVIP

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农业生物技术学报 Journal ofAgriculturalBiotechnology 2007,15 (4): 633~639  ·研究论文 · 小鼠精原细胞体外增殖与冷冻保存 *  ,  ,  ,  , **  李学家 王勇胜 刘凤军 刘 军 张 涌  (西北农林科技大学生物工程研究所,杨凌 712100)  : 7 ( ) 摘要 利用一步酶法将 日龄昆 白系小 鼠睾丸分离获得生精上皮单细胞悬液 主要含精原细胞和支持细胞 , 分别接种于 D­MEM D­MEM/F12 KSOM 、 和 后 , 系统研究其精原细胞的存活和增殖情况, 并对生精上皮单细胞、 曲细精管及完整睾丸进行 70  ( 196  ) , 小鼠精原细胞在 D­MEM D­MEM/F12 了原   ℃冷冻保存 , 同时对生精上皮单细胞进行了液氮冷冻 原   ℃ 保存。 结果表明 和 1~9 / 1~8 , 第 9~13 / 8~12 , 第 17 / 16 中均能存活并增殖 , 表现为在培养 的第 天 天呈逐渐减少趋势 天 天呈增殖趋势 天 天 以后 , 而在 KSOM 。生精上皮单细胞、 曲细精管及完整睾丸 70  (1 2 ) 增殖减缓 中只短暂存活不能增殖 原   ℃短期 周和 周 冷冻保存及单 (2 ) (1 3 ) ( 85%) 细胞悬液液氮短期 周 和中长期 和 个月 冷冻保存后, 均可获得较理想的细胞存活率 均大于 。 : ; 增殖; 冷冻保存 关键词 小鼠; 精原细胞 中图分类号:  S185  文献标识码: A  文章编号:1006­1304(2007)04­0633­07  Proliferation andCryopreservation of Spermatogonia in Mouse  LIXue­jia,WANGYong­sheng,LIUFeng­jun, LIU Jun, ZHANGYong*  Kunming mouse testes of 7 days of age were collected to isolate seminiferous epthelial cells (spermatogonia and  Sertoli cellsmainly)using one step of enzymat

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