《层析柱经典教材》.pdfVIP

柱层析技术 纯化的选择 柱子的选择 过柱最重要两要素（柱子尺寸和流动相） 装柱和上样 特殊样品 注意事项 3 纯化的选择 少量的时候(小于0.5 g), 请考虑使用制备TLC纯化, 方便且快速. 大量且不容易纯化的时候, 请先尝试重结晶. 请务必在化合物极性小的步骤过柱, 这个时候过柱产物 更容易纯化. 如果不影响反应, 可以尝试不纯化, 粗品直接往下做. 也可尝试加保护基, 降低纯化难度. 4 柱子的选择 加压柱：适合小于100-200 g产品的纯化。大尺寸的加压 柱难以制作，用起来危险性大。在公司过柱时，请使用双 链球加压 减压柱：适合任何量的过柱, 比加压柱快，需要减小流动 相极性过柱(比加压柱小一倍), 不然会导致分离效果差。 常压柱：适合大于50-100 g的产品. 常压柱是分离效果最 好的，但是时间也最长。 5 过柱最重要两要素 只要选择好柱子尺寸和流动相, 过柱基本上没有很大问题, 即使有少量气泡, 即使有少量裂纹, 对过柱影响也非常小 。 柱子尺寸 选柱子总的原则：选择稍粗长的柱子. 硅胶量的控制：10 g产品, 10-20 g硅胶拌样, 100-300 g 硅胶上柱. 样品层和硅胶层的比例控制大于10:1. 6 过柱最重要两要素 流动相的选择 流动相的配合：常用石油醚配乙酸乙酯，二氯甲烷配甲醇. 特殊情况有使用苯，甲苯过柱的情况. 流动相的选择方法: 在TLC板上Rf=0.2-0.3的极性过柱.杂 质点以5-X (X指杂质点和所要点相差的Rf值) 倍过柱. 流动相选择的注意事项: 过柱时梯度洗脱, 减少过柱时 间和浪费溶剂. 常用的是200-300目硅胶, 容易过的产品用 100-200目硅胶, 过柱速度更快; 较少用300-400目硅胶. 7 装柱和上样 装柱 干法装柱（YMKD常见方法）：把干硅胶倒入柱子，然后在 下面接上水泵真空把柱子抽5-10分钟，然后加样用石油醚等低 极性淋洗一遍。实践证明挺好用. 湿法装柱适用于常压柱：直接常用石油醚混合硅胶装柱. 8 装柱和上样 上样 干法上样：常用低沸点溶剂(如二氯甲烷）溶解产品, 加1-2 倍重量于样品的硅胶量拌样, 旋干. 要保证在旋干后,不能看到 明显的固体颗粒（那说明有的样品没有吸附在硅胶上). 湿法上样: 直接湿法上样适合液体不粘稠, 所使用的溶剂 溶解样品时越少越好, 不然溶剂就成了淋洗剂了, 间接湿法 上样适合范围广, 特别推荐。 9 特殊样品 敏感化合物可以尝试氧化铝充填过柱（比如醛, 容易开 环的化合物）效果不错. 缺点是氧化铝的吸附能力稍差, 需要降低流动相极性2-5倍。 容易掉Boc基团的化合物, 请用三乙胺碱化硅胶柱子后 再过柱 酸性化合物加1/1000 醋酸, 碱性化合物加1/1000- 1/100氨水或者三乙胺或氨甲醇。