遗传性癫痫大鼠海马GABA能抑制性通路中相关基因表达的研究的机制探讨.pdfVIP

-中文论著摘要· 遗传性癫痫大鼠海马GABA能抑制性通路中相关基因 的表达研究与机制探讨 前言 nervous 氨基酸是中枢神经系统(Centralsystem，CNS)数量最多，分布最广的 acid， 神经递质，在众多的氨基酸中常见的神经递质有Y．氨基丁酸(丫-aminobutyric 根据对CNS作用的不同，氨基酸类神经递质可分为两类：兴奋性氨基酸(Excitatory amino amino acid，IAA)，包 acid，EAA)，主要包括Glu：抑制性氨基酸(Inhibitory 度在癫痫发作时发生了明显的改变。突触小体是一个游离的突触前末端，它是脑 组织在等渗溶液中匀浆时，神经末梢在剪切力的作用下从轴突上断裂下来，自发 封闭形成的独立结构。据报道，突触小体内的氨基酸直接参与到神经元信息的传 递中，而且相对于全脑组织来说，突触小体内氨基酸浓度的改变对癫痫发作的影 响更相关。 GABA是哺乳动物CNS中最主要的抑制性神经递质之一，它能介导抑制性突 触传递作用。目前大量研究表明，中枢神经系统内GABA能抑制作用减弱或缺乏 是导致癫痫发生过程中神经元兴奋性增高的重要原因。 突触间隙中GABA降解的唯一途径只能通过膜上的T．氨基丁酸转运体 acid “．aminobutyric acid 泡GAT(Vesicular7-aminobutyric 目前有文献证实GAT-1和GAT-3是海马中含量最丰富的两种GAT亚型，且最有 可能通过调节突触间隙中的GABA浓度从而导致癫痫的发生。 acid A type 配体门控的氯离子通道受体丫．氨基丁酸A型受体0一aminobutyric 组合形成的五聚体离子通道结构，其中a1是成熟神经元表达最多的亚单位之一， 形成两种不同的抑制，即时相抑制性突触传递和紧张性外周突触抑制，其中包含 口1和丫2亚单位的受体主要位于突触内并且参与时相性突触抑制，而包含a4亚单 位的GABA状主要定位于突触外并且参与海马的紧张性突触抑制。此外， GABAAR介导的快速超极化抑制主要依赖于细胞内的低Cl。浓度，钾氯共转运体二 chloride 亚型(Potassium co缸ansponer2，KCC2)可以将神经元内C1’转运至胞外，从 而产生GABAAR介导的超极化电流。 星形胶质细胞是一种非常常见的胶质细胞，它在调节脑中的突触传递中具有 非常重要的作用。胶质纤维酸性蛋白(G1ial acidic fibrillaryprotein，GFAP)是星形胶 质细胞的一种主要成分，在癫痫发生过程中，GFAP蛋白表达的改变和星形胶质 细胞的病理性改变密切相关。 遗传性癫痫大鼠模型Tremor大鼠(TI洲)出生8周后自发性地出现癫痫小发 作，它的发作无需外加物理化学因素刺激，是研究遗传性癫痫的理想动物模型。 迄今为止，还未见到应用高效液相色谱仪(Highperformanceliquidchromatography， 海马内GAT-1，GAT-3，GABAARal，GABAARa4，GABAAR怛亚单位及KCC2 的研究仍为空白。此外，尽管最近研究表明KCC2的表达在匹鲁卡品诱导的癫痫 模型和难治性癫痫患者中具有明显改变，但是对于癫痫发生过程中KCC2改变的 具体调节机制仍不清楚。同时，虽然目前有研究发现癫痫发生过程中GFAP蛋白 存在明显的改变，但是对于癫痫相关的反应性胶质细胞增生的具体机制还不十分 明确。因此，本研究拟采用RT-PCR，实时定量R