《丙型肝炎病毒（HCV）非结构区NS3-5B蛋白的真核表达载体构建及其在BHK-21细胞中的表达-论文》.pdfVIP

第 13卷 第36期 2013年 12月 科 学 技 术 与 工 程 Vo1．13 No．36 Dec．2013 1671— 1815(2013)36—10794—05 ScienceTechnologyandEngineering ⑥ 2013 Sci．Tech．Engrg． 医药卫生 丙型肝炎病毒(HCV)非结构区NS3-5B蛋白的 真核表达载体构建及其在BHK．21细胞中的表达 韩佩君 雷迎峰 吕 欣 杨 敬 姚 敏 乔卿华 党品香 尹 文 (第四军医大学基础医学部，微生物学与病原生物学教研室，西安710032) 摘 要 通过PCR方法扩增出HCVNS3—5b全长基因序列，克隆入真核表达载体plRES2一EGFP中，构建重组质粒plRES2一EG— FP—NS3—5b。利用脂质体将该质粒转染至BHK一21细胞，通过荧光成像和WesternBlot检测NS3—5b基因的表达。结果显示成 功构建 了真核表达载体pIRES2一EGFP—NS3—5b，并且NS3／4A蛋白和NS5B蛋白得到特异性表达，为下一步建立 HCVRdRp活 性的细胞评价系统和动物模型评价系统奠定 了实验和理论基础。 关键词 丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus，H