高纯度玉米黄色素纯化方法的研究.docVIP

高纯度玉米黄色素纯化方法研究 张金娟1，张雪霞，张丽，王健，李晓露，林旸, 王海燕 （石家庄华北制药集团新药研发公司 050015） 摘要：目的 研究一种从玉米蛋白中得到高纯度玉米黄色素的方法，为工业生产提供参考。方法 玉米蛋白粉粗提物经过饱和氢氧化钠乙醇溶液皂化，中性氧化铝层析，得到紫色晶体。结果 HPLC检测得到玉米黄色素＞90％。结论 该法分离效果好，产品纯度高，适合于工业化生产。 关键词 ： 玉米黄色素；玉米蛋白粉；皂化；中性氧化铝 Study on the Processing Technology of High Purity Corn Yellow Pigment ZHANG Jin-juan , ZHANG Xue-xia, ZHANG Li, WANG Jian ,LI Xiao-lu, LIN Yang, WANG Hai Yan, （New Drug Research Development Company of NCPC，Shijiazhuang 050015） ABSTRACT: OBJECTIVE Study on purification of high purity corn yellow pigment from maize protein meal provide evidence for their industrialized production. METHODS The crude oleoresin was saponified through saturated NaOH—EtOH solution. Purple crystals can be obtained by neutral alumina column chromatographic separation. RESULTS By measurement of HPLC, the content of corn yellow pigment was more than 90%. CONCLUSION This simple and high yielding procedure was applied to the manufactured produce of corn yellow pigment KEY WORDS :; corn gluten meal (CGM); saponification; neutral alumina column 玉米黄色素属异戊二烯类色素,主要含β-胡萝卜素、玉米黄素(3, 3′-二羟基-β-胡萝卜素)、隐黄素(3-羟基-β-胡萝卜素)及叶黄素(3, 3′-二羟基-α-胡萝卜素)等。玉米黄色素和叶黄素是眼睛中发现的惟一的类胡萝卜素，存在于眼睛的视网膜黄斑上。它们可特异性吸收蓝色光线，蓝色光线是到达视网膜的光线中最具损伤性的光波。同时，作为抗氧化剂，叶黄素和玉米黄素还可以通过破坏单线态氧来抑制有害自由基的形成。而氧化、光损伤是造成老年性黄斑退化（AMD）和白内障的主要原因。玉米黄色素因对人体具有重要生理功能而日益受到关注，作为一种功能因子在多领域应用拓展将是今后重点，可以预测，玉米黄色素开发前景将十分光明。目前，关于玉米黄色素的研究比较多[1-3]，但是高纯度玉米黄色素的工艺研究报道很少。本文利用简单可行的工艺从玉米蛋白粉中得到高纯度玉米黄色素，为工业化生产提供参考。 1 仪器与试剂 1.1 仪器 高效液相色谱仪（515泵，996检测器，Waters公司）； Waters 515泵x2组成高压梯度系统；KQ-500B型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸公司）；T-1000型电子天平（常熟双杰测试仪器厂）；SXJQ-1型调速搅拌器（郑州长城科工贸公司）。 1.2 试剂 玉米蛋白粉（玉米黄色素含量为0.05%）（华北制药集团康欣公司）；玉米黄色素标准品(SIGMA)。100-160目层析用中性氧化铝（上海实验试剂有限公司）；丙酮、正己烷、氢氧化钠、碳酸氢钠、无水乙醇、为国产分析纯；乙腈为国产色谱纯。 2 方法与结果 2.1皂化反应 (作者简介：张金娟，女， Tel：0311 E-mail：hyzjj001@ 取玉米蛋白粉提取物1g用正己烷溶解，用不同试剂（见表1）在60℃下搅拌1小时后取几滴皂化液加入热水振荡，如液面上无油滴漂浮，则皂化完全，否则，继续皂化。然后加入丙酮，挤出肥皂，过滤，浓缩母液得浓缩膏。 结果发现用饱和的氢氧化钠乙醇溶液的皂化的最完全，得到的肥皂最多，皂化时间最少故采用此法进行皂化。 表1 不同溶剂的皂化结果 溶剂 肥皂量(g) 皂化时间（h） HPLC检测