罗哌卡因毒性惊厥对不同发育期大鼠海马区Bax、Bcl-2表达及学习记忆能力影响.pdfVIP

＼／／lIl／I／Ik／／／I／／。I／I／／13l／I／／／／／rlll／I鬣／／I／I／5／／／Jll7／／ll／ 罗哌卡因毒性惊厥对不同发育期大鼠海马 Bax、Bcl．2表达及学习记忆能力的影响 硕士研究生：欧益金 指导老师：徐世元教授 摘要 罗哌卡因是目前临床麻醉与疼痛治疗中常用局麻药之一，由于其对神经系 统与心脏毒性低等优点，在儿科领域的应用同益增多。但因婴幼儿特殊的生理 发育特点，其相对于成年人而言，更易发生局部麻醉药的急性全身毒性反应 (LocalAnesthetic Systemic Nervous 难以避免，尤以中枢神经系统(Central System，CNS)与心血管系统毒 性最为严重。CNS毒性惊厥或其持续状态可导致发育中的CNS结构与功能损害， 直接影响患儿生命安全和生存质量。 婴幼儿的药物代谢系统的发育与成年人存在一定差异。酰胺类局部麻醉药 (LocalAnesthetics，LA)主要通过肝脏微粒体酶、酰胺酶分解，代谢产物主要 经肾脏排出，仅有不到5％以原形从尿排出。而婴幼儿肝、肾器官功能的发育与 体格生长平行，在整个小儿时期不断进行，但各年龄阶段生长发育的速度不同Ⅲ。 年龄越小尤其新生儿，血浆蛋白(包括al-酸性糖蛋白、白蛋白、y一球蛋白、脂 蛋白等)含量低，结合药物能力差等因素心1都使游离型LA的比例较成人更高，继 而LA毒性敏感性增加。 婴幼儿的中枢神经系统发育与成年人亦存在不同程度的差异。出生时大脑 已有全部主要的沟回，但皮层较薄，沟裂较浅；神经细胞数目已与成人相同， 但树突与轴突少而短。出生后神经细胞体积逐渐增大和树突增多、加长，神经 髓鞘的逐步形成和发育成熟。3岁时神经细胞分化己基本完成，8岁时接近成人； 摘要 而神经纤维髓鞘化到4岁时才完成n1。有研究指出∞3，海马区齿状回(Do)区域的 神经发生现象(即新生细胞分化为成熟神经元的再生能力)与年龄明显相关，年 龄越小，再生能力越强。故婴幼儿CNS发育成熟度以及神经细胞再生能力均可 能直接影响LAST的严重程度和预后。 LA毒性惊厥发生时，大脑皮层抑制通路受阻滞，引起CNS相对兴奋，神经元 释放兴奋性氨基酸增多，N一甲基一D一天冬氨酸受体过度兴奋，导致神经元内Ca2+ 超载，一氧化氮生成增加，继而可能造成海马区细胞结构与功能损害。目前检 测细胞凋亡表达常用凋亡因子(Bax)与抑凋亡因子(Bci-2)阳性细胞核数目 的表达及两者比值。组织缺血时Bax转录并与Bcl-2竞争线粒体膜通道受体诱发 线粒体释放细胞色素C至胞质，细胞色素C与凋亡蛋白酶激活因子(APAF一1)和 竞争，间接调节蛋白酶和核酸酶活性，从而双相调节细胞凋亡n2·131。 有文献指出m3，惊厥可造成CNS海马区细胞结构损害，继而对海马依赖性的 学习记忆功能产生一定影响。而哺乳动物发育期是认知学习能力形成的关键时 细胞核数目表达及两者比值失衡，可造成海马区结构损害，继而影响其依赖性 的学习记忆功能。目前研究鼠类的空间学习记忆能力常根据其在Morris水迷宫 (MorrisWater Maze，MwM)实验中的表现n钔进行评估。定位航行实验和空问搜 索实验是MWM最基本的实验，实验训练的空间学习记忆属于联合型学习，平台的 位置与大鼠自身所处的位置无关，是一种以异我为参考点的参考认知，所形成 的记忆是空间参考记忆。其完成空间学习和记忆任务时，意识的存储与提取涉 及包括海马在内的大量脑区和神经传导路径。 目前关于LAST导致成人CNS结构和功能的损害的研究报道甚少，而迄今为 止，关于LA对婴幼儿发育中的CNS毒性尤其对海马区神经细胞毒性的研究，笔者 尚未发现相关文献报道。本研究以不同发育期的SD大鼠为研究对象，应用序贯 法测定不同发育期SD大鼠罗哌卡因毒性惊厥的半数有效量(ED。。)，继而建立罗 硕士学位论文 哌卡因毒性惊厥模型，检测海马区细胞凋亡因子(Bax)与抑凋亡因子(Bcl-2) 在惊厥后不同时间点的表达及两者的比值，以及应