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- 2016-10-19 发布于湖北
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实验三 蛋白质的性质实验(一) ——蛋白质和氨基酸的呈色反应 * 实验目的 1.加深了解构成蛋白质的基本结构单位(氨基酸) 和主要连接方式(肽键) 2.了解呈色反应原理 3.学习几种常用的鉴别蛋白质和氨基酸的方法 * # 双缩脲反应 1)原理: 将尿素加热到180℃,则两分子尿素缩合而成一分 子双缩脲,并放出一分子氨。双缩脲在碱性溶液中能 与硫酸铜反应产生红紫色络合物,此反应称双缩脲反 应。(蛋白质分子中含有许多和双缩脲结构相似的肽 键,因此也能起双缩脲反应,形成红紫色络合物。通 常可用此反应来定性鉴定蛋白质,也可根据反应产生 的颜色在540nm处比色,定量测定蛋白质)。 * # 双缩脲反应 2)试剂: (1)尿素 (2)10%氢氧化钠溶液 (3)1%硫酸铜溶液 (4)2%卵清蛋白溶液 2%卵清蛋白或新鲜鸡蛋清溶液(蛋清:水=1:9) * # 双缩脲反应 3)操作: 取少量尿素结晶,放在干燥试管中。用微火加热使 尿素熔化,然后停止加热,尿素放出氨,形成双缩脲。 冷后,加10%氢氧化化钠溶液10滴,振荡混匀,再加1% 硫酸铜溶液2滴,再振荡。观察出现的粉红颜色。要避 免添加过量硫酸铜,否则,生成的蓝色氢氧化铜能掩盖 粉红色
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