微囊藻毒素-LR所致神经小胶质细胞BV-2的炎性反应.pdfVIP

2015 年 9 月 第 27 卷 第 5 期 论 著 Effect of mycrocystin-LR 微囊藻毒素-LR所 on inflammatory response 致神经小胶质细胞 in BV-2 cells BV-2的炎性反应 ZHANG Minhui，ZHOU Jue，LIU Ran， 张敏辉，周 珏，刘 冉， * LI Xiaobo，LIANG Geyu，LI Yunhui 李晓波，梁戈玉，李云晖* (Key Laboratory of Environmental Medicine Engineering, （东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点 Ministry of Education, School of Public Health, Southeast 实验室，江苏 南京 210009） University, Nanjing 210009, Jiangsu, China) 【摘要 】目的： 通过检测微囊藻毒素-LR(MC-LR)对BV-2细胞内一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)，以及培养上清液中的肿瘤坏 死因子-α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)表达的影响，为进一步探讨MC-LR引起中枢神经系统免疫反应奠定基础。 方法：用MC-LR刺激 BV-2细胞建立炎症模型，以四甲基噻唑蓝(MTT)法测定MC-LR对细胞的毒性作用；采用硝酸还原酶法检测BV-2细胞中NO的表达 量；NOS分型法检测NOS的表达水平；酶联免疫吸附实验(ELISA)检测TNF-α和IL-6炎症因子的产生情况。结果：MC-LR染毒24 h后，染毒浓度在0～128 μg/L范围内，随着剂量的增加，细胞活性呈下降趋势(r=-0.609，P0.05)，其半数有效浓度(EC50)为22.49 μg/L。当染毒浓度≥5.0 μg/L时，细胞分泌的IL-6和NOS的含量明显增加，与对照组比较差异具有统计学意义(P0.05)；10.0 μg/L染 毒后TNF-α和NO含量明显增加，与对照组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论：MC-LR诱导BV-2细胞产生大量的炎性细胞因 子NO、NOS、IL-6及TNF-α ，引起神经系统的炎症反应。 【关键词 】微囊藻毒素；BV-2细胞；神经炎症；一氧化氮；一氧化氮合酶 中图分类号：R994.6 文献标志码： A 文章编号： 1004-616X(2015)05-0375-04 doi: 10.3969/j.issn.1004-616x.2015.05.010 【ABSTRACT 】OBJECTIVE: To investigate the effects of mycrocystin-LR(MC-LR) on the neurotoxic mechanisms of the central nervous system，the contents of nitric oxide (NO)，nitric oxide synthase (NOS)，tumor necrosis factor-α (TNF-α)，and interleukin- 6 (IL-6) in BV-2 microglial cells were detected in our study. METHODS ：With the methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay，the cytotoxicity of the inflammatory