b_Boule基因5′调控序列的克隆和睾丸组织DMR甲基化分析.docVIP

中国农业科学  2011,44(18):3859-3867 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2011.18.017 b-Boule 基因 5′调控序列的克隆与 睾丸组织 DMR 甲基化分析  1 1  1，2  1 3 1 1 1  1  （1 南京农业大学动物科技学院，南京 210095；2 东南大学发育与疾病相关基因教育部重点实验室，南京 210009； 3 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室，北京 100093）  摘要：【目的】研究 b-Boule 基因 5′调控序列的序列特征，以及牦牛、黄牛与犏牛睾丸组织 b-Boule 基因 DMR 甲基化状态的差异，为揭示 b-Boule 基因的表达调控和犏牛雄性不育的表观遗传机制提供依据。【方法】采用 PCR 扩增和克隆测序技术获得牦牛 b-Boule 基因 5′调控序列，利用生物信息学方法分析 b-Boule 基因 5′调控序列的序 列特征，采用亚硫酸氢钠测序法检测牦牛、黄牛与犏牛睾丸组织中 b-Boule 基因 DMR 的甲基化状态。结果】b-Boule 基因 5′调控序列长度为 1 352 bp，核心启动子区含有 SP1 等甲基化敏感位点，5′端存在一个 C