抗癌复方蛇葡萄素，5-氟尿嘧啶脂质体制备和抗肿瘤作用与研究.pdfVIP

抗癌复方蛇葡萄素，5一氟尿嘧啶脂质体的制箭和抗肿瘤作用的研究 中山大学 抗癌复方蛇葡萄素，5一氟尿嘧啶脂质体的 制备和抗肿瘤作用的研究 专 业：生药学 硕士研究生：赵莉莎 导 师：刘德育教授 中文摘要 研究背景和目的： 蛇葡萄素(AMP)是从粤蛇葡萄或显齿蛇葡萄中提取的小分子黄酮醇类化 合物。近年来经过本课题组一系列抗肿瘤实验发现，蛇葡萄素在体外可显著抑制 人早幼粒细胞白血病HL一60细胞、人红白血病K562细胞、人鼻咽癌HK．1细胞、 人肝癌Bel．7402细胞、人乳腺癌MCF．7细胞的增殖【2·3，41。蛇葡萄素具有毒性低， 来源广泛，提取率高的优点。但其稳定性较差，易发生氧化反应，给实际应用带 来网难，将其制备成理想的剂型是解决这些问题的一个好办法。我们最近的研究 发现，蛇葡萄素与阿霉素、5一氟尿嘧啶、环磷酰胺等抗肿瘤药物联合应用可产生 协同抗肿瘤作用。 肿瘤的治疗，目前仍然是治疗原发性肝癌的主要药物之一。但其存在着对肿瘤细 胞的选择性差，毒、副作用大，半衰期短，久用易产生耐药性等缺点，限制了其 临床的应用。 单一采用一种药物化疗容易产生耐药性且治疗效果不好，目前多采用联合化 疗，即两种抗癌药物甚至多种抗癌药物联合使用，可增加对癌细胞的细胞毒性； 攻击癌细胞的不同牛物化学靶点；具有不同的抗癌作用机理，产生加和(或)协同 作用：克服癌细胞的耐药性；联合化疗对正常细胞不产生叠加毒性。 抗癌复方蛇葡萄素，5一氟尿嘧啶脂质体的制备和抗肿瘤作用的研究 巾山大学 将脂质体应用在肿瘤的治疗中是一个有意义的突破，脂质体可使药物具有靶 向性和缓释性，脂质体包裹技术可以解决脂溶性药物不易溶于水的难题，提高易 氧化药物在体内外的稳定性，降低被包封药物的毒性，增加药物被增殖旺盛的癌 细胞的摄取量，是抗肿瘤药物的理想载体。 本课题将蛇葡萄素和5．氟尿嘧啶两种抗肿瘤药物同时包封于脂质体给药系 统制备成抗癌复方脂质体，解决了蛇葡萄素难溶性和不稳定性的问题；药物包封 于脂质体后具有缓释性，延长药物的释放时间；使两种药物同时进入癌细胞，产 生协同作用提高对癌细胞的杀灭能力，达到提高药效，降低药物的毒副作用，减 少药物对给药部位的刺激、损伤，提高病人顺应性的目的。 方法： 复方脂质体来测定AMP．5．FU—LP中AMP和5-FU包封率的方法。 2．比较几种脂质体的制各方法，以包封率为指标，确定最优制备方法；在单因 素考察的基础上，采用正交设计进行优化处方和制备工艺，确定 AMP．5．FU．LP的最佳处方组成和制备工艺条件。 3．采用冷冻干燥技术将AMP．5．FU．LP制备成复方脂质体冻干粉，考察了各种冻 干保护剂的保护效果和影响冻干效果的各工艺过程，确定了最佳冻干工艺和 冻干保护剂处方。 4．对冻干前后AMP．5．FU—LP的理化性质进行了考察，包括粒径分布、包封率、 Zeta电位、外观形态、pH值等，用透射电镜观察脂质体的形态，并考察了复 方脂质体的体外释药性，以各项理化性质为指标，考察了复方脂质体在6个 月内的初步稳定性。 抑制率和IC50，同时，观察是否存在时间和剂量依赖性。 抑制率和ICso，同时，观察是否存在时间和剂量依赖性。 U 抗癌复方蛇葡萄素，5一氟尿嘧啶脂质体的制备和抗肿瘤作用的研究 巾山大学 结果： 1 回归方程分别为AAMP=0．04326c+0．004 0．01739，R2=0．9997；经精密度和回收率实验考查，各项指标符合方法学测定 要求；建立了葡聚糖凝胶柱层析法分离游离药物和复方脂质体来测定 AMP．5．FU．LP的包封率的方法。 2．确定薄膜分散超声法为制备方法，以单因素考察结合正交设计优选出的最佳 处方和制备工艺为：主药：卵磷脂=I：20，卵磷脂：胆固醇=5：l，磷脂浓 度50mg／mL：维生素E的用量为5％，磷酸盐缓冲溶液的