聚乳酸单体L-乳酸由米根霉固定化发酵玉米秸秆水解物生产与研究.pdf

Production Study of L-lactic Acid by Immobilized Rhizopus Oryzae from Corn Stalk Hydrolyzate A Thesis Submitted to Chongqing University in Partial Fulfillment of the Requirement for the Degree of Doctor of Engineering By CHEN Xin Supervised by Prof. Wang Yuanliang Specialty: Biomedical Engineering College of Bioengineering of Chongqing University, Chongqing, China October, 2012 中文摘要 摘 要 生物材料聚乳酸是受到广泛关注的生物相容性良好和全生物降解材料，由乳 酸聚合而成。如果聚乳酸单体乳酸能够从廉价的生物质资源通过生物炼制转化而 来，则无论对医学发展、环境保护还是资源节约都具有重要意义。乳酸是基本的 有机酸之一，是一种重要的平台化合物，实现生物炼制生产也是未来生物基经济 代替石油基经济的重要产业组成。要实现生物炼制生产乳酸 目前尚有一些技术瓶 颈需要被攻克，最主要的有两点，一是将木质纤维素原料低成本、高效率的转化 成可生物利用的小分子糖类；二是生物发酵纤维素来源的糖类高效转化生产乳酸。 目前该领域的技术积累还不能完全满足大规模的工业化生产，相关产业的经济效 益还不能与以石油为基础的产业相比。本研究将针对这两大技术瓶颈，围绕农作 物秸秆木质纤维素的高效糖化技术、米根霉固定化发酵生产乳酸等内容展开研究。 我国是农业大国，农作物秸秆资源丰富，在各类秸秆资源中尤其以玉米秸秆 最为丰富。如何提高玉米秸秆的糖化效率是利用该资源进行生物炼制，用于生产 平台化合物的关键。在利用纤维素酶水解玉米秸秆纤维素生产葡萄糖的过程中， 秸秆的致密结构是酶解 β-1,4-糖苷键的主要障碍，本研究中我们采用蒸汽爆破技术 对木质纤维素结构进行破坏，以提高纤维素酶解效率。 在蒸汽爆破预处理玉米秸秆的研究中，以酶解还原糖产率为响应值，采用均 匀实验设计得到最佳汽爆工艺条件，即汽爆压力 2.2MPa 、液固比 1:1、维压时间 9min、物料颗粒度40-60 目。在此工艺条件下酶解还原糖产率是未处理原料的1.97 倍。化学组分分析显示，蒸汽爆破处理后秸秆物料中纤维素含量及木质素含量相 对于原料分别增加了 29.73%和 19.65%，说明通过蒸汽爆破预处理能够提高秸秆物 料中纤维素的相对含量。SEM 观察可见，蒸汽爆破处理后其结构破坏明显，表面 出现褶皱，结构变的蓬松，比表面积增大。 以优化工艺对玉米秸秆进行蒸汽爆破预处理，然后进行水/醇抽提处理，将纤 维素、半纤维素和木质素等组分进行分离，进一步提高纤维素酶的可及性。对底 物浓度、纤维素酶用量、酶解反应时间等因数采用单因素分析和响应面分析实验 进行工艺优化。以酶解还原糖产率为响应值，对回归方程求解得到的最佳工艺条 件为：底物浓度 53.28g/L，纤维素酶用量 53.32FPU/g，酶解时间 60.45h，此工艺 条件下还原糖产率的最大预测值为 694.11mg/g 。经过试验验证，得到酶解后还原 糖产率为 672.36mg/g ，与模型预测结果接近。在相同酶解工艺条件下，经过蒸汽 爆破-水/醇处理后物料酶解还原糖产率较原料提高了 170.46%，较单纯蒸汽爆破后 物料提高了 28.97% 。化学组分分析显示，水/醇处理能有效分离纤维素、半纤维以 I 重庆大学博士学位论文 及木质素，进一步提高物料中的纤维素