三种食源性致病菌多重PCR快速检测方法研究.pdfVIP

摘要 食品安全作为一个重大的世界性公共卫生问题，越来越受到人们的重视。在各类 食品安全事件中，由细菌引起的食物中毒事件占有较大的比例，是引起食物中毒的重 要因素之一。其中，沙门氏菌(Salmonella)、单增李斯特氏菌(Listeria 和小肠结肠炎耶尔森氏菌(Yersinia 们能够污染多种食品。目前，国内检测食品中致病菌主要采用传统的分离、培养、生 化鉴定的方法，其操作繁琐，检测时间较长，通常需要一周才能完成，且灵敏度较低， 已经不能满足食品中致病菌快速灵敏检测的需要。与普通PCR有相同原理的多重PCR 是一种快速、高效且高通量的检测方法，能同时检测多种食源性致病菌，节省成本和 时间，该方法在致病菌检测领域有着广泛的应用前景。 本研究根据沙门氏菌菌毛砌瑾因、单增李斯特氏菌溶血素J1．蚴基因和小肠结肠 炎耶尔森氏菌粘附侵袭位点口f瑾因设计了三对特异性引物，建立了同时检测三种食源 性致病菌的多重PCR方法。根据影响多重PCR反应的因素，利用两个正交试验设计分 10xPCR 度进行优化，最终确定多重PCR反应体系为25此：3．8IxL buffer，1．5¨L M