基因工程知识结构(生工)..docVIP

《基因工程》课程第一章 基因工程的内容与应用 （一）基本概念 通过基因操作，将目的基因或DNA片段与合适的载体连接转入目标生物细胞，通过复制、转录、翻译外源基因以及蛋白质的活性表达，使转基因生物获得新的遗传性状的操作。 （二）Technical process of genetic engineering 1．Cloning of target gene2．Preparation of vectors 3．Joining the target gene to vectors to produce recombinant DNA 4．Introduction the recombinant DNA into host cells 5．Identification and selection of the recombinant 6．Propagation of the recombinant DNA in a host cell （三）Basic conditions 1．Four elements: Target gene, Vectors, Enzymes, Host cells 2．Three major components: Donors, Receptors, Vectors 3．Three tools: Restriction endonucleaseMolecular scissors DNA ligaseMolecular glue VectorsMolecular Transporter 1．Purpose There are many areas in which genetic manipulation is of value, including the following: Production of useful protein by novel methods: 1982年，第一个基因工程菌生产药物重组人胰岛素，在美国和英国获准使用，标志着医药领域进入一个新纪元。 (2) Generation of transgenic plants and animals: 1981年，Palmiter和Brinster成功获得第一个转基因小鼠 (3) Genome analysis by DNA sequencing: 1999年，中国正式加入“人类基因组计划”（HGP human genome project）。 (4) Basic research on gene structure and function: 1990年，美国批准第一个体细胞基因治疗方案。 2．Application （1）第四次工业大革命 a 医学：抗病毒、抗癌因子、新型抗生素、疫苗、抗衰老保健品、心脏血管药物等 b 轻工食品：氨基酸、助鲜剂、甜味剂、食品色素、酒类、油类、淀粉酶等 c 化学能源：石油二次开采、有机物生产、纤维素分解、生物能、太阳能转换 d 环保：分解性能较高的工程菌种和具有特殊降解功能的菌株，如石油降解质粒、农药降解质粒、工业降解质粒 e 信息：蛋白芯片、基因芯片 （2）第二次农业大革命 a 生物农药：蛋白类杀虫剂、除草剂 b 农作物品种改良：高营养、长保存、抗环境压力、抗病虫害、花卉颜色与型状 c 畜牧业：高蛋白乳汁、鱼生长激素、饲料利用率 d 固氮作用 （3）第二次医学大革命 a 疫苗：DNA重组乙肝疫苗 b 药物：多肽和蛋白质：重组人胰岛素、干扰素、人生长激素、白细胞介素-2等 酶类：尿激酶原、链激酶、天冬酰氨酸、超氧化物歧化酶等 c基因诊断：(-珠蛋白基因探针检测镰状细胞贫血症、(-珠蛋白基因探针检测地中海贫血症、苯丙氨酸转移酶基因探针检测苯丙酮酸症 d 基因治疗：腺苷脱氨酶缺乏症、肿瘤、心血管病、糖尿病 理论基础和技术支撑 1.理论上的三大发现 基因的载体是DNA DNA的双螺旋结构和半保留复制机理 遗传信息的传递方式（中心法则）和三联体密码子系统的建立 2.技术上的三大发现 A number of developments provided the necessary stimulus for gene manipulation to become a reality. 1）EnzymesCutting and joining DNA 2）DNA sequence 3）Vectors DNA replication （二）发展历程 1．诞生 1973年，Cohen等获得了抗四环素和卡那霉素的重组菌落TcrNer，基因工程发展史上第一次实验重组体转化成功，标志着基因工程的诞生。 2．发展 3．腾飞 Nucleases：Nuclease enzymes degrade nucleic acids by