牛磺鹅去氧胆酸对抗地塞米松诱导小鼠肾上腺皮质细胞系Y1凋亡研究.pdfVIP

本研究由“国家自然科学基金”资助 项目编 FoundationOfChina 英文缩略词表 目录 中文摘要…………………………………………………………………………………I ABSTRACT……………………………………………．…………………………………………………．．III 1引言……………………………………………………………………………………………………………．．1 1．1胆汁酸及牛磺鹅去氧胆酸研究概况……………………………………………．．1 1．1．1胆汁酸的研究概况………………………………………………………………l 1．1．2牛磺鹅去氧胆酸的研究概况……………………………………………………2 1．1．3牛磺鹅去氧胆酸的药效学作用的研究概况……………………………………2 1．2TGR5受体的研究概况……………………………………………………………3 1．3RNA干扰的研究概况……………………………………………………………4 1．3．1 RNA干扰的机制………………………………………………………………．5 1．3．2 RNA干扰技术的局限性………………………………………………………．6 1．3．3 RNA干扰技术在科学研究中的应用…………………………………………．6 1．4细胞凋亡及具有抗细胞凋亡作用药物的研究概况……………………………一8 1．4．1细胞凋亡及细胞凋亡的检测技术………………………………………………8 1．4．2具有抗细胞凋亡作用药物的研究概况…………………………………………8 1．5细胞增殖及具有促细胞增殖作用药物研究概况………………………………10 1．5．1细胞增殖及细胞增殖调控的概述……………………………………………．10 1．5．2具有促细胞增殖作用药物的研究概况………………………………………．1l 1．6课题研究目的与意义……………………………………………………………12 2材料与方法………………………………………………………………………一13 2．1实验材料…………………………………………………………………………13 2．1．1实验细胞………………………………………………………………………．13 2．1．2实验试剂………………………………………………………………………．13 2．1．3溶液配制………………………………………………………………………．．14 2．1．4仪器设备………………………………………………………………………．16 2．1．5数据分析………………………………………………………………………．17 2．2实验方法…………………………………………………………………………17 2．2．1 Y1细胞的体外培养……………………………………………………………17 2．2．2Y1细胞TGR5受体检测………………………………………………………18 2．2．3 TCDCA对Y1细胞抗凋亡作用的研究………………………………………2l 2．2．4TCDCA对Y1细胞凋亡抑制蛋白基因表达的影响…………………………23 2．2．5TCDCA对Y1细胞增殖的影响………………………………………………27 2．2．6 YI细胞TGR5受体的干扰……………………………………………………28 2．2．7 TCDCA对干扰后Y1细胞抗凋亡作用的研究………………………………29 2．2．8 TCDCA对干扰后Y1细胞凋亡抑制蛋白基因表达的影响…………………．29 2．2．9 TCDCA对干扰后Yl细胞增殖的影响………………………………………30 3结果与分析………………………………………………………………………．．30 3．1Y1细胞TGR5受体检测结果的分析…………………………………………．．30 3．1．1提取总RNA完整性和纯度结果的分析……………………………………一30 3．1．2 RT-PCR结果的分析…………………………………………………………．．31 3．2TCDCA对Yl细胞抗凋亡作用结果的分析……………………………………32 3．2．1DEX诱导Yl细胞凋亡作用结果的分析……………………………………32 3．2．2TCDCA对抗DEX诱导Y1细胞凋亡作用结果的分析…