原生质体融合选育耐高温柠檬酸生产菌.pdfVIP

第 １３卷第５期 生　 物　 加　 工　 过　 程 Ｖｏｌ１３ Ｎｏ５ ２０１５年９月 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｓｅｐ２０１５ － ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊｉｓｓｎ１６７２ ３６７８２０１５０５００５ 原生质体融合选育耐高温柠檬酸生产菌 徐　 凯，张伟国 （江南大学 工业生物技术教育部重点实验室，江苏 无锡 ２１４１２２） 摘　 要：为获得耐高温柠檬酸生产菌，利用原生质体融合技术将具有优良性状的高产菌株Ｗ和耐高温柠檬酸生产 菌Ｙ ７１１进行融合，筛选耐高温的高产柠檬酸生产菌。 通过变色圈筛选得到融合株Ｒ５０２，在４０ ℃培养７２ ｈ就可 产酸１１８７ ｇ／ Ｌ，其产酸量比亲本菌株分别高１０５％和２１０％，培养时间分别减少１４３％和７７％，该菌株遗传稳 定。 原生质体融合是一种有效获得耐高温柠檬酸生产菌的方法。 关键词：原生质体融合；黑曲霉；耐高温柠檬酸生产菌株 － － － 中图分类号：Ｑ７８４　 　 　 　 文献标志码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１６７２ ３６７８（２０１５）０５ ００２６ ０５ Ｈｉｇｈ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｃｒｉｔｉｃ ａｃｉｄ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｓｔｒａｉｎ ｂｒｅｅｄｉｎｇ ｂｙ ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ｆｕｓｉｏｎ ＸＵ Ｋａｉ，ＺＨＡＮＧ Ｗｅｉｇｕｏ （Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｊｉａｎｇｎａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｗｕｘｉ ２１４１２２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ｈｉｇｈ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｃｒｉｔｉｃ ａｃｉｄ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｓｔｒａｉｎ，ｔｈｅ ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ｏｆ ｈｉｇｈ⁃ｙｉｅｌｄ ｓｔｒａｉｎ Ｗ ａｎｄ ｈｉｇｈ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｍｕｔａｎｔ ｓｔｒａｉｎ Ｙ⁃７１１ｗｅｒｅｆｕｓｅｄ．Ｔｈｅ ｏｂｔａｉｎｅｄｆｕｓｉｏｎ ｓｔｒａｉｎ Ｒ５０２ ｐｒｏｄｕｃｅｄ １１８７ ｇ／ Ｌ ａｃｉｄ ａｆｔｅｒ ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ａｔ ４０ ℃ ｆｏｒ ７２ ｈ． Ｔｈｅ ａｃｉｄ ｙｉｅｌｄ ｏｆ ｓｔａｉｎ Ｒ５０２ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ １０５％ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｓｔｒａｉｎ Ｗ ａｎｄ ２１０％ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｓｔｒａｉｎ Ｙ⁃７１１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ｒｅｄｕｃｅｄ １４３％ ｃｏｍｐａｒｅｄｔｏ ｓｔｒａｉｎＷａｎｄ７７％ ｃｏｍｐａｒｅｄｔｏ ｓｔｒａｉｎＹ⁃７１１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｓｔｒａｉｎ Ｒ５０２ ｗａｓ ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ ｓｔａｂｌｅ．Ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔｆｕｓｉｏｎｉｓａｎ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄｔｏｏｂｔａｉｎ ａｈｉｇｈｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｃｉｔｒｉｃ ａｃｉｄ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｓｔｒａｉｎ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｒｏｔｏｐｌａｓｔ ｆｕｓｉｏｎ；Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ；ｈｉｇｈ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｃｒｉｔｉｃ ａｃｉｄ ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｓｔｒａｉｎ 　 　 柠檬酸，又名枸橼酸，是生物体主要的代谢产 酵温度每升高１℃，则每吨柠檬酸至少减少循环冷 物之一，被广泛应用于食品、医药和化工等行业