人工关节硅酸二钙涂层离子溶液促成骨能力及机理的体外实验的研究.pdf

人工关节硅酸二钙涂层离子溶液促成骨能力及其机理的体外实验研究 人工关节硅酸二钙涂层离子溶液促成骨能力及其 机理的体外实验研究 中文摘要 第一部分硅酸二钙离子溶液促进 成骨细胞增殖活性的研究 【摘要l目的试图阐明等离子喷涂于钛基的硅酸二钙涂层的溶解能力及在不同溶液 中的主要离子变化，以及这些离子溶解物对成骨细胞增殖能力的影响。 方法将等 离子喷涂硅酸二钙涂层的金属钛片浸泡于200mlDMEM培养基及双蒸水中，370C下 培养基及正常DMEM培养基分别培养MG63细胞，定期观察细胞形态学特征，于第 3、6、9、12天四个时间点分别以MTT法检测细胞增殖情况；以流式细胞仪分析各 时间点的细胞周期情况。 结果经浸泡等离子喷涂于金属钛基的硅酸二钙涂层后的 DMEM培养基及双蒸水中Si离子均明显升高，与正常培养基相比差异显著(条件 DMEMVSDMEM P0．05，双蒸水(浸泡后)ⅧDMEMP0．01)；Ca及P离子浓度 细胞形态未见明显差异。第3天实验组MTT值明显高于对照组，其差异显著(p 0．01)。此后三个时间点两组间MTT值差异均无统计学意义，第9、12天时实验组 MTT值甚至略低于对照组。细胞周期分析结果显示在培养第3天时实验组S期细胞 所占比例显著高于对照组；而实验组G0／G1期细胞百分比则明显低于对照组；两组 间G2／M期细胞所占比例无统计学差异，但实验组略高于对照组。第6，9，12天时 实验组S期细胞百分比仍然高于对照组，但无统计学差异。同样，第6，9，12天时 两组细胞间G0／G1期及G2／M期细胞所占的百分比之间也没有显著性的差异。结论 等离子喷涂硅酸二钙涂层浸泡于DMEM培养基72h后，溶液中硅离子浓度明显增高。 硅酸二钙离子溶液条件培养基有促进MG63细胞早期增殖的能力，而对晚期增殖无明 人工关节硅酸二钙涂层离子溶液促成骨能力及其机理的体外实验研究 中文摘要 显促进作用。其促成骨细胞增殖的能力可能与条件培养基中较高的硅离子浓度有关， 并可能是与上调S期及G2／M期细胞比例并同时降低G0／G1期细胞的比例有关的。 【关键词】成骨细胞，增殖，硅酸二钙，细胞周期 第二部分硅酸二钙离子溶液促进 成骨细胞分化能力的研究 【接要】目的探讨等离子喷涂硅酸二钙涂层离子溶液对MG63成骨样细胞分化能力 的影响。 方法 人成骨肉瘤来源的具有成骨活性的MG63细胞分别培养于正常 原、碱性磷酸酶及骨钙素的基因表达情况。结果对照组ALP活性随培养时间的增 加呈现出逐渐增加的趋势，但增加辐度较低；实验组ALP活性从第3天起即明显高 于对照组，此后随培养时间增加而逐渐增加，第6天时两组间差异更加明显，第9 天时仍然明显高于对照组，第12天时较第9天略有降低，但仍然明显高于对照组。 Runx2的基因表达于第3，6天两个时间点在两组之间无明显差异，但第9，12天时， mRNA的表达在整个 实验组的表达量明显高于对照组(p0．05)。对照组细胞ALP 培养过程中无明显变化，实验组从第3天起即明显高于对照组，但差异不明显(p 0．05)。从第6天起实验组ALP基因表达量明显高于对照组，并随培养时间增加而明 显增加，其表达量在其后所有时间点均显著高于对照组(p0．05)。I型胶原和骨钙 素的表达变化的趋势相似，在对照组各个时间点均无明显差别，但实验组基因表达呈 现逐渐增高的趋势，然后于第12天时略降低。与对照组相比，第9、12天时I型胶 结论硅酸二钙离子溶解物 原与骨钙素的基因表达量均显著高于对照组(p0．05)。 除了能促进MG63细胞早期分化外，还具有促进其晚期分化的能力，这与其它同样具 有CaO．Si02成分并能释放硅离子的生物活性材料对成骨细胞增殖分化的影响是一致 的，表明硅酸二钙也是一种良好的生物活性材料。 【关键词】硅酸二钙，成骨细胞，分化，基因表达 Il 人工关节硅酸二钙涂层离子溶液促成骨