脊髓小胶质细胞调制痛觉突触传递长时程增强效应-—P2X7受体作用及研究.pdf

中文摘要 中文摘要 脊髓小胶质细胞调制痛觉突触传递的长时程增强效应 一P2x7受体作用研究 强直刺激大鼠坐骨神经可诱发脊髓背角痛敏神经元反应的长时程增强(10ng-tem 神经诱导的大鼠脊髓LTP的产生和痛觉中枢敏化中的作用。 既往电生理研究证实，强直电刺激大鼠坐骨神经、皮肤自然伤害性刺激或神经损 伤，均可在脊髓背角引起C反应和A反应场电位的L1’P，反映了痛觉信息传递的 中枢敏化。引起脊髓m的强直电刺激能引起动物的痛觉过敏行为，包括触诱发痛 和热痛敏，但机制尚不完全明确。 近年来的研究证明，脊髓胶质细胞，尤其是小胶质细胞在病理性疼痛的发生发展 中发挥重要作用。炎性痛和神经病理痛情况下均有小胶质细胞的激活。预先应用胶质 L11D)，而不是LTP，同时可缓解痛觉过敏行为，表明小胶质细胞参与脊髓伤害性反应 的长时程增强，然而其具体机制尚不清楚。 P2X7受体在胶质细胞上大量表达，参与神经元和胶质细胞的对话。P2X7受体 激活后，可促进在海马LTP形成中起关键作用的谷氨酸、白介素．1beta necrosis (硫erleukin．1D，IL．1酌、肿瘤坏死因子俚(tumor 受体拮抗剂抑制神经损伤诱发的脊髓神经元的自发放电和痛行为。P2X7基因敲除的 小鼠慢性炎症痛及神经病理痛均消失。因此，P2X7受体很可能是介导小胶质细胞参 与脊髓LTP产生的关键介质。 本研究采用脊髓场电位的电生理记录、伤害性机械痛行为学测试、免疫组织化学 及Wbstem blot等方法，探讨小胶质细胞的P2X7受体在强直刺激坐骨神经诱发的脊 髓UrP及长时程的痛觉过敏行为中的作用。主要结果如下： l、小胶质细胞参与强直刺激坐骨神经诱发的脊髓伤害性反应的长时程增强 强直刺激坐骨神经诱发大鼠脊髓场电位C反应的长时程增强和持续的触诱 5 中文摘要 发痛；强直刺激前l小时鞘内注射小胶质细胞代谢抑制剂美满霉素阻断LTP的 产生：强直刺激前l小时至强直刺激后7天每天1次鞘内连续注射美满霉素缓 解大鼠的触诱发痛行为。以上表明，小胶质细胞参与强直刺激坐骨神经诱发的脊 髓LTP及痛觉敏化行为的产生。 2、P2x7受体参与脊髓LTP的产生 可阻断脊髓L1rP的产生；强直刺激前7天鞘内注射的P2X7受体的小干扰 RNA片段，也阻断脊髓LTP的产生；离体脊髓切片上预先应用BBG灌流l小 时，可阻断强直刺激李骚束所诱发的脊髓兴奋性突触后场电位的LTP，而不影响 基础反应。以上表明，P2X7受体在脊髓场电位的LTP产生中具有至关重要的作 用。 3、拮抗P2x7受体抑制强勘制激坐骨神经诱发的触诱发痛和Fos表达 解强直刺激所诱发的双侧触诱发痛；强直刺激前0．5小时鞘内注射BBG可明显 抑制强直刺激后2小时Fos的表达上调。表明拮抗P2X7受体功能可显著抑制 脊髓痛敏神经元的活动过度增强。 4、P2x7受体在小胶质细胞的表达 免疫组化结果表明，P2X7受体与小胶质细胞标志物OX．42共标，而与星形 胶质细胞标志物GFAP及神经元标志物NeuN无共标；强直刺激坐骨神经激活 脊髓小胶质细胞和明显上调P2X7受体的表达，且均可被强直刺激前O．5小时鞘 内注射P2X7受体拮抗剂BBG所抑制。以上表明脊髓LTP的阻断是小胶质细 胞P2X7受体的特异性的作用。 5、P2x7受体的作用由几．1p信号通路介导 protein 键作用的AMPA受体的GluRl亚基表达的显著增加，且均可被强直刺激前0．5 小时鞘内注射P2X7受体拮抗剂BBG所抑制：强直刺激前0．5小时鞘内注射 上调。以上表明，P2X7受体参与脊髓伤害性反应长时程增强的产生是通过IL．1B 信号通路激活而实现的。 6 中文摘要 6、IL．18介导的小胶质细胞和星形胶质细胞之间的相互作用参与病理性痛的维持