维生素C二步发酵伴生菌的筛选及发酵条件优化.pdfVIP

摘要 维生素C二步发酵法，第一步由单菌发酵将D．山梨醇转化为L_山梨糖，第二步由产酸 菌氧化葡萄糖酸杆菌与伴生茵腊状芽孢杆菌混合发酵将LI山梨糖转化为2．酮基．L．古龙酸 (维生素C前体)。 本文通过对来源不同的苏云金芽孢杆菌进行分离、纯化、虫体复壮处理、遗传稳定性 考察，筛选出一株新的伴生菌与生产用小菌氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)组成 新菌系B15．14，并对其生物学特性进行了研究。结果表明：新组合菌与生产用菌系25B相 比，摇瓶发酵周期缩短4h，糖酸转化率提高5．5个百分点，经传代稳定性考察，性状稳定。 养基中一个明显的特点就是对数期长，同一时期大小菌之间的数量比例低于生产菌系；在 发酵过程中新菌系B15．14中小菌生长速度明显快于CK，菌体总生物量增加也较快。 为了更好的发挥新组合菌系B15．14的发酵潜能，我们对其单因素发酵条件进行了研 瓶最适装液量为20ml，最适起始山梨糖浓度为8％，最适发酵温度为29℃一31℃，最适初始 pH值为6．7—7．0。 利用均匀设计对新菌系B15．14发酵培养基进行了优化，结果表明：在实验选定的条件 范围内，最适发酵培养基成分配比为玉米浆3．02％、KH2P04 0．03％、尿素 0．25％、MgS04 0．43％。以生产菌系25B为对照，新菌系在最优化条件下进行十批次摇瓶发酵实验，结果 表明，新菌系较同期的25B转化率提高了3．32％，平均发酵周期缩短了2．2h，新菌系表现 出了较高的应用前景。 关键词：维生素C二步发酵，苏云金芽孢杆菌，氧化葡萄糖酸杆菌，2．酮基．L古龙酸，发 酵条件优化 Abstract InanindustrialvitaminC fermentationis manufacturingprocedure，atwo—step adoptedconverting D·sorbitolisinvolvedinthefrist fermentation．Inthe step second two—celllineCO-fermentation step，a containsGluconobacterastheconverterandBacillus asthe system，which oxydans megateriumhelper， L—sorboseisconvertedtO the of is Vc． 2-keto—L-gulonicaicd(2一KGA)，whichprecursor The isthattheBacillus fromdifferentsourcesweredone paper thuringiensis andinsect the anew reasearched andselectedstrainsB15-14 rejuvenation，then geneticstability composed withassociatedbacteriaandthe acid