暨大生化课件第八章蛋白质降解和氨基酸代谢.ppt

第八章 蛋白质降解和氨基酸代谢 联合脱氨 一碳单位及其载体 氨基酸合成的主要原料来自糖代谢 必需氨基酸和非必需氨基酸 必需氨基酸(essential amino acid)指体内需要而又不能自身合成，必须由食物供给的氨基酸，共有8种：Val、Ile、Leu、Thr、Met、Lys、Phe、Trp。 其余12种氨基酸体内可以合成，称非必需氨基酸 氨基酸代谢小结 生物固氮 固氮作用是地球上氮循环的一个重要部分。 只有某些原核生物才能固氮。固氮分自生与共生固氮两大类。 * 一：蛋白质的降解 外源蛋白质的消化吸收主要发生在小肠 蛋白酶原在小肠激活 蛋白质水解成氨基酸，吸收 根据各种蛋白酶活性部位的性质分为四大类 丝氨酸蛋白酶 （丝氨酸、组氨酸、天冬氨酸） 巯基蛋白酶 　（半胱氨酸、组氨酸）（木瓜蛋白酶） 天冬氨酸蛋白酶 （两个天冬氨酸）（胃蛋白酶） 金属蛋白酶 　胰脏羧肽酶A (Zn2+、谷氨酸、酪氨酸）。 蛋白质营养 氮平衡(nitrogen balance) 生理需要量：成人每日最低蛋白质需要量为30－50g，我国营养学会推荐成人每日蛋白质需要量为80g 蛋白质的营养价值取决于必需氨基酸的数量、种类、比例 真核生物中蛋白质的降解有两条途径 溶酶体内降解过程 依赖泛素(ubiquitin)的降解过程 依赖ATP 降解异常蛋白和短寿命蛋白 溶酶体途径 主要降解经胞吞进入细胞中的胞外蛋白质 五十多种水解酶 微酸性pH（5） 没有选择性，主要降解外源蛋白、膜蛋白及长寿命的细胞内蛋白 76个氨基酸的小分子蛋白(8.5kD)，普遍存在于真核生物中，一级结构高度保守 1975年从小牛的胰脏中分离出来的。 80年代初，发现它有调节蛋白质死亡的作用，才称它为“死亡标签”。 切哈诺沃、赫尔什科和罗斯获得2004年度诺贝尔奖。 泛素（ubiquitin）简介 1. 泛素化(ubiquitination) 泛素与选择性被降解蛋白质形成共价连接，并使其激活。 涉及EI、E2、E3。 典型的哺乳动物体内都含有一种或数种不同的EI ，几十种E2和几百种不同的E3 E3是决定细胞中哪一种蛋白质需要在蛋白酶体中被“处死”的决策者 泛素介导的蛋白质降解过程 蛋白酶体(proteasome)对泛素化蛋白质的降解 细胞中30％以上的新合成蛋白质是经过蛋白酶体降解的 泛素分子链则是开启蛋白酶体这个“垃圾桶”的“钥匙” 进入蛋白酶体的蛋白质，经过处理会分解成7～9个氨基酸的短链 一个人体细胞含有３万个蛋白酶体 泛素介导的蛋白质降解过程 E1类酶激活泛素（需ATP） 泛素转移至E2类酶 E3类酶具有特异性，可以识别目标蛋白质，与目标蛋白质接近的E2-泛素复合体将泛素转移至目标蛋白质； E3类酶释放出被泛素标记的蛋白 被标记的蛋白尾端形成一小段泛素分子链； 泛素分子链在蛋白酶体的端口被识别并脱离蛋白质，目标蛋白质进入蛋白酶复合体的桶状通道最终降解为缩氨酸并由另一端口释放出去。 二：氨基酸分解的核心在于脱氨 催化氨基酸直接脱氨的酶 催化氧化脱氨的酶 黄素蛋白：Ｌ-氨基酸氧化酶、D-氨基酸氧化酶 吡啶蛋白：Glu脱氢酶 非氧化脱氨。 水解、脱水、加氢、脱硫化氢等 仅L-谷氨酸脱氢酶有明显的生理活性 在氨基酸代谢中起重要作用的脱氨酶是L-谷氨酸脱氢酶。 是一种变构酶，GTP、ATP是变构抑制剂 氨基酸代谢的枢纽——转氨 在转氨酶（aminotransferase）的催化下，α-氨基酸和α-酮酸之间发生的氨基转移反应 其中一个底物对为α-酮戊二酸/Glu 除Gly、Lys、Thr、Pro、HO-Pro外 转氨机理 H2O 转氨基作用的主要生物学意义在于转氨不脱氨，避免了氨对代谢的干扰。 转氨基作用不仅是体内多数氨基酸脱氨基的重要方式，也是机体合成非必需氨基酸的重要途径。 转氨作用的生理意义 氨基酸 谷氨酸 α-酮酸 α-酮戊二酸 H2O+NAD(P)+ 转氨酶 NH3+NAD(P)H L-谷氨酸脱氢酶 联合脱氨：转氨与脱氨两种脱氨基方式的联合作用，使氨基酸脱下α-氨基生成α-酮酸的过程。 嘌呤核苷酸循环 苹果酸 腺苷酸 代琥珀酸 次黄嘌呤 核苷酸 (IMP) 腺苷酸代琥 珀酸合成酶 α-酮戊 二酸 氨基酸 谷氨酸 α-酮酸 转氨酶 1 草酰乙酸 天冬氨酸 转氨酶 2 主要在肌肉组织进行。 腺苷酸 脱氢酶 H2O NH3 延胡索酸 腺嘌呤 核苷酸 (AMP) 高浓度的氨对高等动物具有毒性 高等动物的大脑对氨极敏感，血中1%的氨会引起中枢神经中毒 氨中毒的机理：在脑细胞的线粒体大量消耗α-酮戊二酸等 氨的排泄 排氨动物（水生如鱼类） 尿素形成（陆栖高等动物和两栖类） 排尿