病毒的纯化和检测改.pptVIP

第一节 病毒的纯化 一、病毒纯化前的准备工作 繁殖病毒 利用生物学方法纯化病毒 病毒感染的纯化与诊断 二、标本的采取与送检 应注意下列原则： 1.对本身带有杂菌 (如咽拭子、粪便) 或易受污染的标本，要进行病毒分离培养时，应使用抗生素。 2.因病毒在室温中易失去活性，标本应低温保存并尽快送检。 3.血清学诊断标本的采取应在发病初期和病后各取血清，以便对比双份血清抗体效价的动态变化。 三、病毒和病毒成份的提纯 病毒纯度的判定依据： 物理均一性； 病毒滴度与蛋白含量的比例； 免疫反应单一而无非特异反应； 结晶形成 在病毒不失活的前提下，从宿主细胞中释放出来； 病毒的纯化可以应用提纯蛋白质的技术方法； 对大小、形状和密度高度一致的病毒粒子， 可以采用分级分离的技术。 病毒提纯的主要原则： 四、病毒萃取液的分级纯化 沉淀法 中性盐沉淀法 聚乙二醇沉淀法 有机溶剂沉淀法 等电点沉淀法 离 心 法 差速离心法 密度梯度离心法 速率区带离心法 等密度区带法 凝胶色谱法 电泳法 病毒的感染单位（IU）：能够引起宿主或宿主细胞发生一定特异性反应的病毒最小剂量； 病毒效价：指单位体积(ml)病毒悬液的感染单位数目(IU／ml)或称毒力 ； 噬菌体效价（pfu) ：又称噬菌斑形成单位数指单位体积的噬菌体，能使感染细菌裂解，产生噬菌斑的数量。 因为病毒粒子对细菌细胞感