κ-卡拉胶寡糖的高效毛细管电泳分析方法的研究.pdfVIP

98911i【7 分类号 ． ． 一密瓤一： 一———，一 ’ 一 L。一 UpC．_．．—．—．——二．．．．．．——二-．．．．．．————————-—。———————一 研究生j+学．位j论文 K-卡拉胶寡糖的高效毛细管电泳 分析方法韵研究 指导教师姓名 螂f学位叛飘 盈．=_土．．专蝉番。药．物一皿乙望．_ 。 一、 论文锋辩日措_望噬篷垒县釜皇学位授予鼍牝型醺生量且- 中国海洋大、学 K一卡拉胶寡糖的高效毛细管电泳分析方法研究 摘要 一D一半乳糖连接而成的一种海洋酸性寡糖，它有着多种生物活性，如：抗凝、抗 病毒、增强免疫功能、抗肿瘤及抗炎活性等。它也广泛应用于保健食品方面，同 时，它在结构与带电性等方面与内源性寡糖有很多相似之处，所以它有着很多潜 在的活性应用价值。 高效毛细管电泳是近20年发展起来的一种新的分离技术，它以快速、高效、 高灵敏、所需样品少、低实验消耗等优点被广泛应用各个领域。八十年代末开始 应用于糖类物质的分析，并获得了快速的发展。本论文首次利用高效毛细管区带 电泳模式一紫外检测(CZE—UV)，进行了k一卡拉胶寡糖的高效毛细管电泳分离分 析方法的研究。 首先将k一卡拉胶酸降解并且用Bio—Gel—P6柱纯化，由于降解产物没有紫外 吸收特征，也没有荧光发光基团，对其进行分析检测比较困难。利用柱前衍生技 术， 与衍生试剂 8一氨基萘基一1，3，6一三磺酸 Oisodium sulfonicacid (8-aminonaphthalene一1，3，6一tri salt，ANTS)反应， 引入荧光基团。对衍生条件和电泳分析条件，包括衍生溶液浓度、pH值、反应 时间、温度及缓冲液浓度、pH值、工作电压、分离温度和缓冲液添加剂对寡糖 一ANTS衍生物分离的影响，实现了k一卡拉胶寡糖的高效分离，确定了标准曲线及 线性范围。并将该方法应用于k一卡拉胶酸水解过程中产生的寡糖的分析，获得了 良好的分离分析效果。 本文较为系统的研究了K一卡拉胶低聚糖的毛细管电泳分离分析方法。这些 方法也可借鉴于研究其它的海洋酸性多糖，对酸性寡糖毛细管电泳分离分析方法 的研究有着重要的意义。 关键词：高效毛细管电泳；k一卡拉胶寡糖；8一氨基萘基一1，3，6一三磺酸；衍生化 s ofK—car oI Analysi rageenanigosaccharidesbyHigh Performancei I I EI i s Capary ectrophores Abstract a kindofmarineacidic of k-carrageenan(KC)is made oligosaccharides 43)-D—galactopyranose(Galp)-4一O-sulfo p一(1 groupand值一(1_÷4)一3，6一anhydro—D— has galact。pyraIl。se(An