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负性共刺激分子BTLA/HVEM 在慢性乙肝患者外周血T 细胞上的表达特性及临床意义 中文摘要 中文摘要 乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus, HBV)是一种不直接引起细胞破坏的嗜肝性 DNA 病毒，是导致慢性乙型肝炎（Chronic hepatitis B, CHB ）、乙肝肝硬化、甚至 是导致肝癌的主要原因之一。由HBV 持续感染引起的CHB 是世界性传染病，严 重威胁着人类健康。机体中HBV 特异性T 细胞通过与HBV 抗原多肽结合后对感 染的肝细胞进行识别并予以杀灭，被认为是导致肝细胞损伤及病毒清除的主要机 + + 制。体内存在一定数量、活跃的、多特异性的CD4 和CD8 T 细胞与HBV 病毒的 + + 清除密切相关。研究发现慢性HBV 感染的患者，其体内HBV 特异性CD4 和CD8 T 细胞数量及应答功能出现不足导致病毒清除无效，这种现象叫做 T 细胞耗竭，它 是病毒持续感染和肝脏炎症的主要因素。 T 细胞功能的正常发挥需要双信号的刺激，其接受的第一信号由抗原提呈细胞 （antigen presenting cell ，APC ）表达的MHC-抗原肽复合物和T 细胞表面的T 细 胞受体（T cell receptor ，TCR ）相互结合产生，而第二信号由共刺激分子的相互作 用提供。而近年来发现，共刺激分子中除了有参与传递正性信号的正性共刺激分 子，还有负性共刺激分子，对免疫细胞的适当活化与增殖发挥调节作用。研究发 现耗竭T 细胞表面异常性高表达负性共刺激分子，目前研究较多有：PD-1、CTLA-4 和Tim-3 分子等。B 、T 淋巴细胞衰减子（B and T lymphocyte attenuator，BTLA ） 是 2003 年新发现的负性共刺激分子，其属于 CD28/B7 超家族成员。配体为 TNFR/TNF 家族的成员单纯疱疹病毒侵入介质HVEM （herpesvirus entry mediator ）。 BTLA 和配体 HVEM 结合后，胞浆区的三个酪氨酸残基都可以磷酸化，ITIM （immunoreceptor tyrosine-based inhibitory motif ）招募酪氨酸磷酸酶 SHP-1 和 SHP-2 ，并进一步介导传递抑制T 细胞活化、增殖的负性信号。部分研究也初步揭 示了BTLA/HVEM 信号通路在T 细胞耗竭中可能起到了重要的作用。 本研究通过流式细胞术检测了慢性乙肝患者外周血中 T 细胞上 BTLA 和 HVEM 共刺激分子的表达特性，并分析了它们的表达水平与慢性乙肝相关的临床 指标之间的相关性。探讨了 BTLA/HVEM 对 HBV 慢性感染的影响，从而初步揭 I 负性共刺激分子BTLA/HVEM 在慢性乙肝患者外周血T 细胞上的表达特性及临床意义 中文摘要 示了负性共刺激分子在 T 细胞上的表达特性及其意义，为临床诊断提供有价值的 指标。 第一部分 负性共刺激分子BTLA 及其配体HVEM 在慢性乙肝患 者外周血T 细胞上表达的检测与分析 + 【目的】采用免疫荧光标记和流式细胞术检测 CHB 患者外周血 CD4 T 和 + CD8 T 细胞表面表达的BTLA 和HVEM 分子的表达水平，探讨BTLA/HVEM 共 刺激信号在CHB 发病机制中可能的作用，进一步为有效治疗CHB 提供理论依据。 【方法】采用免疫荧光标记和流式细胞术检测了44 例慢性乙肝患者和 40 例